高效液相色谱HPL基本原理.pptVIP

、概述 高效液相色谱(HPLC是以溶剂液体为流动相的色谱方法。按照固定相 不同可分为:液液分配色谱;吸附色谱(液固色谱);离子交换色谱;尺寸排 阻色谱(凝胶渗透色谱)。 早期液相色谱,包括Twe的工作,都是在直径1~5cm,长50~500cm的玻 璃柱中进行的。为保证有一定的柱流速,填充的固定相颗粒直径多在 150-200m范围内。即使这样,流速仍然很低( ImL/mir),分析时间仍然很 长 当加压增加流速(真空或空气泵)时,尽管分析时间减少,但柱塔板高度 Hma也相应增加了!或者说柱效下降了。 为了解决分析时间及柱效问题,人们认识到:最为有效地增加柱效的唯 方法是减小填充物的粒径(3-10pm)! 直到60年代,由于在高压下操作的液压设备、高效固定相以及高灵敏检 测器的出现及发展,才彻底解决了分析时间及柱效的问题。即所谓的高效 液相色谱技术才真正得到广泛应用  1)高效液相色谱与经典液相色谱方法的比较 髙速εHPLC采用高压输液设备,流速大增加,分析速度极快,只需数 分钟;而经典方法靠重力加料,完成一次分析需时数小时 高效:填充物颗粒极细且规则,固定相涂渍均匀、传质阻力小,因而柱 效很高。可以在数分钟内完成数百种物质的分离。 高灵敏度:检测器灵敏度极高:UV-10g,荧光检测器—10g 2)HPLC与GC的比较 分析对象及范围:GC