化验员操作注意事项.docVIP

一、试验过程中出现气泡的原因 1、浸在流动相中的 过滤器脏了会导致不断气泡产生，或者输液不畅。 解决方法是用浸泡乙醇中用超声波震荡清洗30min，污染严重可先用30%硝酸震荡清洗，再用纯水震荡清洗30分钟? ? 2、四氟软管有破裂或褶皱也会产生气泡，同时若四氟软管与泵连接的四氟垫圈密封不好也会产生大量气泡，表现是流动相虽然脱气但还是有大量气泡产生? ? 3、流动相液面过低使浸在流动相中的过滤器裸露再空气中也会产生上述情况。二、 液相色谱仪的输液泵都有单向阀，单向就是只一个方向通，单向阀故障会导致压力不稳，压力上不去。单向阀故障主要有：? ? 1、单向阀被异物堵塞，吸不上液。解决办法是用超声波清洗单向阀组件。? ? 2、单向阀两相都通，压力上不去。解决办法重装单向阀或向厂家求助。? ? 3、单向阀内有气泡，表现是压力上不去，或不稳，解决办法用大流量冲洗单向阀（6ml/min).? ? 4、单向阀泄露，要更换密封装置。柱压不稳不一定来自色谱柱。三、缓冲液应用的几点建议? ? 缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和ph值，减少拖尾。但是使用缓冲液要注意几点：? ? 1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。? ? 2、缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。? ? 3、实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用90：10的水甲醇冲洗，在用100%甲醇饱和。? ? 4、使用缓冲液要及时掌握ph范围，做到胸中有数。? ? 5、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。? ? 6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路（拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗）可以避免液路的堵塞。? ? 7、选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦四、溶剂过滤器是液相色谱常用的辅助设备，用来过滤流动相；使用注意以下事项：? ? 1、溶剂过滤器是易碎品，切不可整体搬移，特别不能拿着夹子搬移? ? 2、过滤膜选择要选择合格产品，不合格的会溶进杂质，可用待过滤的溶剂浸泡24小时看有无溶解现象，以考察过滤膜质量。? ? 3、过滤膜分有机和水系，要区分开。? ? 4、水系过滤，有机用有机膜，最好过滤后再混合，混合后的流动相用哪个比例大用哪种膜。? ? 5、膜不分反正，但最好光滑一面向上，粗糟一面向下过滤效果会好。? ? 6、废弃过滤膜不要随意丢弃，过滤膜对环境有污染，不宜绛解。收集统一处理。? ? 7、溶剂过滤器配套的无油 真空泵抽气时，不要等液体空后再拔软管，不宜拔出，会压扁软管，剩一点液时就停泵。? ? 8、过滤好的溶剂要避免二次污染。五、混合溶剂必须要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，绝对不能用水系的。因为水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。六、标样或样品最好用流动相溶解(排除特殊情况)，可以避免很多麻烦。七、给色谱柱加温，温度升高的目的，部分在于增加溶质的溶解度，但更重要的是降低溶剂的黏度，从而改进峰形和分离度。注意：温度升高会降低保留时间，这对分离度也有影响，温度的变化对谱带宽度的影响甚大，而塔板高度受温度的影响虽然也取决于所采用的色谱类型，而温度升高总是要降低塔板高度的。八、C18柱的柱温一般不要超过40摄氏度，否则健合相容易脱落的。 九.数字修约规则? 通常称为四舍六入五成双法则,四舍六入五考虑,即当尾数≤4时舍去,尾数为6时进位,当尾数恰为5时,则应视保留的未位数是奇数还是偶数,5前为偶数应将5舍去,5前为奇数则将5进位. 十．我国的标准分为哪几类?分为国家标准、行业标准、地方标准和企业标准四大类。 十一.液管或吸量管如何调节液面？将移液管或吸量管向上提升离开液面，管的末端仍靠在盛溶液器皿的内壁上，管身保持直立，略为放松食指，使管内溶液慢慢从下口流出，直到溶液的弯月面底部与标线相切为止，立崐即用食指压紧管口，将尖端的液滴靠壁去掉，移出移液管或吸量管，插入承接溶液的器皿中。 十二如何放出移液管或吸量管中溶液？ 承接溶液的器皿如是锥形瓶，应使锥形瓶倾斜，移液管或吸量管直立，管下端紧靠锥形瓶内壁，放开食指，让溶液沿瓶壁流下。流完后管尖端接触瓶内壁约15s后，再将移液管或吸量管移去。残留在管末端的少量溶液，不可用外力强使其流出，因校准移液管或吸量管时已考虑了末端保留溶液的体积。 十三如何将溶液转移到容量瓶中？ 在转移过程中，用一根玻璃棒插入容量瓶内，烧杯嘴紧崐靠玻璃棒，使溶液沿玻璃棒慢慢流入，玻璃棒下