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DNA复制过程 .......... * 1.复制的起始 （一）原核生物DNA复制过程 .......... * .......... * DNA复制的起始就是要解开双链和生成引物。 (1)DNA解成单链 由拓扑异构酶松弛超螺旋，解螺旋酶 解开双链，SSB结合到单链上使其稳定。 复制起始的解链需要多种蛋白质参与。这些蛋白质与复制起始点的特有序列结合，促使其邻近的DNA解链。 .......... * 首先起始复合体（DnaA-ATP）与4×9bp重复序列结合，3×13bp(富含AT)重复序列在Ⅱ型拓扑异构酶的作用下，使3×13bp重复序列区域松弛，再在DNA解旋酶(DnaB蛋白）的作用下，3×13bp区域发生解链；复制泡被单链结合蛋白(SSB蛋白)覆盖，以免断裂和再复性；引物酶结合到模板DNA上并合成一段短的RNA，作为合成DNA的引物，引发第一个复制叉的先导链的复制，接下来是双向复制。 .......... * .......... * .......... * (2)引物合成 引发体引导引物酶到达适当的位置合成引物。 .......... * 参与原核生物复制起始的主要成分 DnaA蛋白 DnaB蛋白(解螺旋酶) DnaC蛋白 DnaG蛋白(引物酶) SSB 拓朴异构酶 oriC 辨认起始点 解开DNA双链 协助DnaB蛋白 催化形成RNA引物 稳定解开的单链DNA 理顺DNA链 大肠杆菌的复制起始点 .......... * 2.复制的延长 1）在DNA聚合酶Ⅲ的作用下 2）前导链合成1000-2000个核苷酸后 3）随从链开始合成，岗崎片段的长度 为1000-2000个（大肠杆菌）  4）PolⅢ为不对称二聚体， 一个作用于前导链， 另一个作用于随从链(loop)。  .......... * 3′ 5′ .......... * .......... * 领头链 (leading strand) 顺着解链方向生成的子链，其复制是 连续进行的，得到一条连续的子链。 .......... * 随从链 (lagging strand) 复制方向与解链方向相反，须等解开 足够长度的模板链才能继续复制，得到 的子链由不连续的片段所组成。 .......... * 三、复制的终止 去除RNA引物 补充空缺 连接 DNA聚合酶Ⅰ的小片段 5’ 3’外切酶 DNA聚合酶Ⅰ的大片段 3’ 5’外切酶 5’ 3’聚合酶 DNA连接酶 .......... * .......... * .......... * .......... * （二）真核生物DNA的复制特点 酵母的复制起始点称为ARS(autonomously replicating sequences,自主复制序列 )，长约15Obp左右，包括数个复制起始必需的保守区，其核心序列富含AT。真核生物DNA复制的起始需要起点辨认复合物(ORC)参与。真核生物DNA复制叉的移动速度比原核生物慢得多（大约只有5Obp/s，还不到大肠杆菌的1/20）。 .......... * 1．DNA复制起始过程 真核生物有多个复制起始点(ori)。复制起始点有特殊的序列。起点辩认复合物（ORC）组装在起始部位上，形成复制叉。ORC在起始点上的组装还不足以开始起动，另一种复合物称小染色体维系蛋白（MCM）必须参与。MCM有较弱的解旋酶的活性。此外，还需拓扑异构酶、复制因子(RF)、增值细胞核抗原（PCNA）的参与。此外需要DNA-pol α（引物酶活性）和pol δ（解螺旋酶活性）参与。 .......... * 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。相关的激酶都有调节亚基即细胞周期蛋白(cyclin)，和催化亚基即细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)。 .......... * CDK 相匹配的周期蛋白 作用点 CDK2 Cyclin D1, D2, D3 G1期 Cyclin E G1→S期 Cyclin A S期 CDK3和CDK4 Cyclin D1, D2, D3 G2期 CDK1（CDC2） Cyclin A, B G2→M期 哺乳类动物的周期蛋白和CDK .......... * .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iu