兽药检测技术 细菌内毒素检查技术 6细菌内毒素检查技术.ppt

细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 一、意义 细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。1EU与1个内毒素国际单位相当。 兽药检测技术 每批新的鲎试剂用于试验之前均要进行灵敏度的复核。 当进行新兽药的内毒素检查试验前，或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验。 当鲎试剂、供试品的处方、生产工艺改变或试验环境发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。 二、操作要求 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 细菌内毒素检查有凝胶法和光度测定法两种方法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 三、方法和仪器 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 三、方法和仪器 凝胶法是利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素的方法，分为凝胶限量试验和凝胶半定量试验。凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015 EU·mL-1的灭菌注射用水。光度测定用的检查用水，其内毒素的含量应小于0.015 EU·mL-1。 1.凝胶法 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 三、方法和仪器 光度测定法包括浊度法和显色基质法。浊度法是利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法；显色基质法是利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少而测定内毒素含量的方法。 细菌内毒素检查技术 2.光度测定法 超净工作台 兽药检测技术 细菌内毒素检查技术 电热恒温干燥箱 3.仪器 细菌内毒素检查专用干式恒温器 兽药检测技术 旋涡混合器 细菌内毒素检查技术 1.限制L的确定 2.确定最大有效稀释倍数（MVD） 3.鲎试剂灵敏度复核试验 4.凝胶法干扰试验 5.正式干扰试验 6.凝胶限量试验/半定量试验 兽药检测技术 四、检查步骤 细菌内毒素检查技术 将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性（＋）；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性（－）。 兽药检测技术 五、结果判定 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 1.凝胶限量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术 兽药检测技术 五、结果判定 2.凝胶半定量试验 细菌内毒素检查技术