放射性配体与受体结合分析实验RBA方法.ppt

放射性配体与受体结合分析实验（RBA）方法;内容;实验定义与原理;RBA的分类;实验材料与仪器;实验材料;实验仪器;低温高速离心机 凯达，TGL20M 超低温冰箱 海尔;数显恒温水浴锅 金燕，HH-S26S 制冰机 GELIN 型号IMS-50 automatic ice flakes;电热恒温水温箱;实验材料;枪头;Tris PPO与POPOP;过滤装置;放射性化合物;实验方法流程;实验方法流程;实验具体操作（D1、D2、5-HT）;2、制备膜受体 ;3、加样;4、 受体配体结合反应;5 、分离游离及结合的放射性配体;6、 测定结合型放射配体每分钟放射计数;7、数据处理;8、各种指标;Scatchard方程与作图（饱和实验）;Scatchard方程与作图;饱和曲线; 饱和曲线(saturation curve); 2）曲线的高度取决于[RT]。在曲线起始段，曲线上升的快慢即曲线的斜率取决于配基与受体的亲和力，所以，KD越小 (亲和力越大)，饱和曲线上升越快，KD越大 (亲和力越小)，饱和曲线上升越慢。 （即：亲和力越大，受体与配件结合速度越快，时间越短） k1, v1 [R]+[L] －－－－ [RL] k2, v2