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学习情境 3 微生物酶发酵制药技术 生产工艺过程 谢 谢！ * * * 固定化酶产品介绍 氨基酰化酶：这是世界上第一种工业化生产的固定化酶，可以用于生产各种L-氨基酸药物。 1969年，日本田边制药公司将从米曲霉中提取分离得到的氨基酰化酶，用DEAE-葡聚糖凝胶为载体通过离子键结合法制成固定化酶，将L-乙酰氨基酸水解生成L-氨基酸，用来拆分DL-乙酰氨基酸，连续生产L-氨基酸。剩余的D-乙酰氨基酸经过消旋化，生成DL-乙酰氨基酸．再进行拆分。生产成本仅为用游离酶生产成本的60％左右。 * 固定化酶法生产L-氨基酸 乙酰-DL－Ala L－Ala+乙酰-D－Ala Aminoacylase 氨基酰化酶 * 泵 储 罐 反应产物 离心机 消旋反应器 固定化酶柱子 DEAE-葡聚糖 －氨基酰化酶 晶体 L-Ala L-Ala A-D-Ala A-L-Ala A-D-Ala * (2)天门冬氨酸酶：1973年日本用聚丙烯酰胺凝胶为载体，将具有高活力天门冬氨酸酶的大肠杆菌菌体包埋制成固定化天门冬氨酸酶，用于工业化生产，将延胡索酸转化生产L-天门冬氨酸。 1978年以后，改用角叉菜胶为载体制备固定化酶，也可将天门冬氨酸酶从大肠杆菌细胞中提取分离出来，再用离子键结合法制成固定化酶，用于工业化生产。 * (3)天门冬氨酸脱羧酶：将含天门冬氨酸脱羧酶的假单胞菌菌体，用凝胶包埋法制成固定化天门冬氨酸脱羧酶，于1982年用于工业化生产，催化L-天门冬氨酸脱去羧基，生产L-丙氨酸。 * (4)青霉素酰化酶：是在药物生产中广泛应用的一种固定化酶。可用多种方法固定化。1973年已用于工业化生产，用于制造各种半合成青霉素和头孢菌素。 用同一种固定化青霉素酰化酶，只要改变pH等条件，就既可以催化青霉素或头孢菌素水解生成6一氨基青霉烷酸(6一APA)或7一氨基头孢霉烷酸(7一ACA)，也可以催化6一APA或7一ACA与其他的羧酸衍生物进行反应，以合成新的具有不同侧链基团的青霉素或头孢霉素。 * 固定化细胞法生产6-氨基青霉烷酸 青霉素酰化酶与抗生素改造 * * * E.Coli 斜面 细胞 固定化细胞 青霉素G 转化液 滤液 6-APA 粗品 培养 固定 转化 过滤 抽提 1.技术路线 * 青霉素酰化酶转化流程图
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