肝细胞原代培养实验方案.pdfVIP

. 原代培养肝细胞是肝细胞移植、 生物人工肝的最佳生物材料。 长期以 来 , 国内外众多学者对肝细胞分离方法 、培养条件进行了大量的研 究 , 但要获得高活率、 功能好的肝细胞 , 至今仍非易事。 早期主要用 非酶法分离肝细胞 , 包括机械法 ( 如匀浆法 ) 及螯合法。机械法对肝 细胞损伤大 , 细胞活率低 ; 螯合法是用可结合 Ca2+ 、Mg2 +的螯合 剂( 如枸橼酸盐或 EDTA) 分离肝细胞 , 但螯合剂单独使用效果不好 , 常需与酶法结合使用。 后期逐渐改为酶消化法分离肝细胞 , 包括胶原 酶消化法、胰蛋白酶消化法 。后者对酶浓度及作用时间要求十分严