__凝胶渗透色谱精讲.pptVIP

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第5章凝胶渗透色谱法 色谱原理 流动相:载气 固定相:固体吸附剂等 遴相动方向 AAAA 态HU CCcc AaAA ,BBB 中问 CCcc AAAA CCCC 捡测器 浓度信号 图气相色谱对样品分离过程示意图 色谱谱图解析 谱图表示方法 横坐标时间 纵坐标检测器响应信号的大小色谱图 迎 C 时间 色谱图的解析:色谱峰的位置 色谱峰的大小和形状 色谱峰的分离 保留值:保留时间 死时间 调整保留时间与固定液用量有 关 比保留体积相对保留值保留指数 色谱过程方程:V=V VR=VM+KVs 色谱的保留值与热力学系数联系起来 色谱流出曲线方程:——研究色谱峰形 塔板理论:高斯分布曲线 标准偏差 √n /2 2 描述色谱峰大小的参数 峰高h 峰宽WW=40 分离度:描述峰分离情况R=210 W,+w 分离因素:保留值峰窄 色谱定性分析一一依据保留值 与已知组分的保留值相比 与其它分析方法连用如IR 色谱定量分析——峰高或峰面积判断分析 物 的含量 色谱优缺点 高效快速分离技术 难以鉴别分离组分 1GPc的基本机理 凝胶渗透色谱是一种液相色谱,原理是利 用高分子溶液通过一根装填有凝胶的柱子 在柱中按分子大小进行分离。 柱子为玻璃柱或金属柱,内填装有交联度 很高的球形凝胶。其中的凝胶类型有很多, 都是根据具体的要求而确定(常用的有聚苯 乙烯凝胶)。然而无论哪一种填料,他们都 有一个共同点,就是球形凝胶本身都有很多 按一定分布的大小不同的孔洞。 尺寸不同的高聚物分子,按其分子大小能自由 地渗透进和渗透出这些凝胶孔 凝胶孔洞与分子尺寸是相适应的,超过这个尺 寸的大分子就不能渗透进去,它们只能随溶剂的 流动而在凝胶粒子之间的空间中流动。因此,大 分子比起小分子来说,在柱中的行程就短得多 根据大小分子不同的行程就可以把混在一起的 高聚物分子逐级分离开来,先分离出来的是大分 子,较小的聚合物分子受到溶剂分子的排斥也随 后分离出来,然后再用一定的方法检知每级中溶 质的浓度和分子量

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