食品药品分析检测技术 食品药品分析检测技术 第二章中药制剂样品预处理.ppt

微波辅助萃取 微波辅助萃取（MAE）是将样品置于不吸收微波的容器中，用微波加热，进行萃取的一种方法。 样品的分离净化 关键——保留有效成分 提取液大多还需进一步分离净化，除去干扰组分后才可进行测定。 常用的分离净化方法有以下几种，萃取法、蒸馏法、色谱法、沉淀法、盐析法、消化法。 其中萃取和蒸馏既是提取方法，也是分离净化方法。 萃取法 蒸馏法 沉淀法 色谱法 盐析法 消化法 分离净化方法 原则：从提取液中除去对测定有干扰的杂质，而又不损失被测定成分 依据：被测定成分和杂质在理化性质上的差异，结合测定方法的要求 注意： 1）过量的试剂若干扰被测组分的测定，则应设法除去； 2）大量杂质以沉淀形式除去时，被测成分不应产生共沉淀而损失； 3）被测组分生成沉淀时，其沉淀经分离后可重新溶解或直接用重量法测定。 沉淀法 沉淀法是基于某些试剂与被测成分或杂质生成沉淀，分离沉淀或保留溶液以得到净化的方法。 产妇康颗粒中水苏碱的含量测定（2010版药典） 利用雷氏盐（硫氰酸铬铵）作沉淀剂，在酸性介质中 与大部分有机碱生成难溶于水的配合物与其它杂质分 离。 色谱法 按操作方式： 柱色谱、薄层色谱、纸色谱 分离的原理： 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、 凝胶色谱 其中，微柱色谱设备简单，使用方便、快速，净化效率高，最常用。 当目标物与填料极性相似时，样品流过柱后，目标物在填料上有较好的保留，而极性与填料相差较远的杂质直接流出，再用适当洗脱液把目标物洗脱、收集，分析；或使杂质保留于柱上，直接洗脱被测成分进行测定。 微柱色谱，也称固相萃取或液-固萃取（LSE） 柱的大小：长5～15cm，内径0.5～1cm 原理 硅胶、氧化铝 键合相硅胶 大孔树脂 聚酰胺 硅藻土、纤维素 离子交换树脂 填料 硅胶 作用机制： 溶质在吸附剂表面的极性吸附作用。非极性或极性低的杂质先被洗出色谱柱，再用适当极性的溶剂洗脱被测成分，而强极性的杂质仍保留在柱上。 特点： 通常适于酸性和中性物质的分离；如分离碱性物质，可在展开剂中加入少量稀碱。 氧化铝 分离机制： 溶质在吸附剂表面的极性吸附作用 碱性氧化铝适于碱性和中性物质的分离 酸性氧化铝适于分析酸性和中性物质 中性氧化铝能将黄酮类成份吸附在柱上，可用于生物碱、苷的分离。 八宝坤顺丸 中国药典 2010年版 对照品溶液的制备 取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30ug的溶液，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取重量差异项下的本品，剪碎，取约2g，精密称定，精密加入70%甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25ml，通过中性氧化铝柱（100~200目，2g，内径1cm，用50%甲醇湿法装柱），收集至50ml量瓶中，再用50%甲醇洗脱，收集洗脱液至近刻度，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液10ul与供试品溶液10 ~15ul，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每丸含白芍以芍药苷计，不得少于2.6mg。 键合相硅胶 十八烷基键合相硅胶（简称C18或ODS） 借助化学反应方法将固定液的官能团键合在硅胶的表面而构成键合相硅胶。 常用于脂溶性和水溶性成分的分离，如苷元和苷的分离。 操作: 活化----2ml甲醇冲洗以润湿键合相和除去杂质，再以0.5ml水洗去柱中甲醇。 上样----将样品用一定的溶剂溶解转移入柱。 清洗----最大程度除去干扰物（2-5ml水）。 洗脱----用小体积的溶剂（2-5ml甲醇）将被测物质洗脱下来并收集。 大孔树脂 特点：表面积大，传质速率较高，具有不同的极性及适于吸附较大分子。 极性：丙稀酰胺聚合物 非极性：苯乙烯和二乙烯苯的共聚物 极性化合物 非极性水溶性成分 吸附 树脂在使用前需要前处理：用甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂除去杂质，有时还需用酸、碱清洗。该填料用量常为1～2g，有时也用100～150mg来萃取血、尿中药物。 测定复方归芪剂中的黄芪甲苷 用大孔树脂除去水溶性的多糖杂质，再用30%乙醇洗脱 黄芪甲苷。 聚酰胺 测定黄酮时，用样品的乙醇提取液上聚酰胺柱，水洗去部分杂质， 以95%乙醇洗脱总黄酮后测定。 机制：主要通过与溶质形成氢键而产生吸附作用 用于含酚、酸、醌类药物样品液的净化分离。 硅藻土、纤维素 机制：分配作用 应用：多以水基质液为固定相，与水不混溶的有机溶剂为流动