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荧光光谱分祈仪
分析测试中心
陈仕云
分子荧光光谱仪
B
原子荧光光谱仪
第一节荧光光谱分析仪
20L3J226
概述
③荧光:某些物质吸收光能量后,可发射波长与
激发光波长相同或不同的光,当激发光源停止
照射试样时,再发射过程立即停止,这种再发
射的光称为荧光( fluorescence)。荧光包括
分子荧光和原子荧光。
荧光分析法:通过测定物质分子产生的荧光强
度进行物质的定性与定量分析的方法。
°荧光光谱仪:采用荧光分析法来测量的仪器。
概述
荧光产生机制物质的分子吸收了照射光的能
量后,处于基态最低能级的分子被激发到电
孑激发态的各个振动能级。被激发的分子与
周围的分孑碰撞,并把部分能量以热能的形
式传给周围的分子,自己降落到单线第二电
孑激发态的最低振动能级。然后,由此最低
振动能级向基态的各个振动能级跃迁,同时
以发光的形式释放出其能量。这种光即为荧
光。
概述
1.振动弛豫
2.内转换
3.猝灭
4.系间跨越
s单重态
T多重态
1A2激发波长;x荧光3磷光
分子去活化过程及荧光产生示意图
、概述
荧光分析的特点
⊙优点:灵敏度高(可达10~129g数量级);
选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物;
用样量少、特异性好、操作简便。
⑧缺点:对温度、PH值等因素变化比较敏感;
应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质
或与某些试剂作用后发荧光的物质。
、荧光分析的基本原理
(一)激发光谱和荧光光谱
任何发射荧光的物质都具有两个特征光谱,
即激发光谱( excitation spectrun)和荧光光
谱( fluorescence spectrum)。
激发光谱和荧光光谱是荧光分析中定性和定量
的基础。
、荧光分析的基本原理
激发光谱:连续改变激发光波长,固定荧光发
射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质
溶液发射的荧光强度的变化
以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作
图,即可得到荧光物质
的激发光谱。
从激发光谱图上可找到
发生荧光强度最强的
激发波长λeX
、荧光分析的基本原理
荧光光谱:用λex作激发光源,并固定强度,测
定不同波长的荧光强度。
以荧光浪长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图,
便得荧光光谱。荧光强度最强的波长为λem。
荧光物质的入ex和入em
是鉴定物质的依据,也
是定量测定中所选用的
最灵敏的波长。
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