环境微生物实验;环境微生物学?;目的
? 了解环境中微生物的主要类群,掌握环境 微生物学实验的基本操作技能;
? 学习掌握微生物对环境污染物的降解与转 化规律,和基本的环境微生物学分子分析 技术。
? 加深理解现代环境微生物学课的理论知识, 培养观察、思考及独立分析问题和解决问 题的能力,特别是创新思路。;实验内容;涉及的实验技术;课程安排与要求;实验一:细菌形态观察,土壤微生 物的稀释分离;实验原理:;? 培养基的配制与灭菌;? 细菌单染技术;基本流程:
? 实验的准备工作(洗涤需要用的实验器皿)
--- 培养基的制备--- 包扎---实验器皿灭菌--- 样品稀释分离、细菌观察;操作步骤:;? 土壤样品的稀释分离;细菌单染色;? 涂片 取洁净的载玻片,在无菌的条件下各滴一小滴生理盐水(或 蒸溜水)于玻片中央,用接种环以无菌操作,挑取少许菌苔于水 滴中,混匀并涂成薄膜。注意滴生理盐水(蒸馏水)和取菌时 不宜过多且涂抹要均匀,不宜过厚。
? 固定 室温自然干燥。也可以将涂面朝上在酒精灯上方稍微加热, 使其干燥。但切勿离火焰太近,因温度太高会破坏菌体形态。
? 染色 将玻片平放于玻片搁架上,滴加染液1~2滴于涂片上(染液 刚好覆盖涂片薄膜为宜)。草酸铵结晶紫染色约1min 。
? 水洗 倾去染液,用自来水从载玻片一端轻轻冲洗,直至从涂片 上流下的水无色为止。水洗时,不要水流直接冲
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