分光光度计实验报告-分光光度实验报告.pdf

实验六 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 王思雨 P 中国科学技术大学生命科学院 摘要 本实验中我们通过使用 722 型分光光度计测量出了溴酚蓝 (Bromphenalblue) 的最大吸收波长，并了解了溶液浓度对 max 的影响 以及酸度对 B.P.B 的影响和用缓冲溶液调节溶液酸度的方法。 关键词 分光光度计 溴酚蓝 电离平衡常数 1．前言 本实验用分光光度法测定弱电解质溴酚蓝的电离平衡常数。溴酚 蓝是一种酸碱指示剂， 本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小， 所 以用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常 数。而分光光度法可以利用不同波长对其组分的不同吸收来确定体系 中组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。 + － HA H+A [H ][ A ] 其平衡常数为： Ka (6 －2) [ HA ] － 溶液的颜色是由显色物质 HA 与 A 引起的，其变色范围 PH 在 3.1 ～4.6 之间，当 PH 3.1 时，溶液的颜色主要由 HA 引起的，呈黄 － 色；在 PH≥4.6 时，溶液的颜色主要由 A 引起，呈蓝色。实验证明， 对蓝色产生最大吸收的单色光的波长对黄色不产生吸收， 在其最大吸 － 收波长时黄色消光为 0 或很小。用对 A 产生最大吸收波长的单色光 － － 测定电离后的混合溶液的消光，可求出 A 的浓度。令 A 在显色物质 中所占的分数为 X，则 HA所占的摩尔分数为 1－X，所以 X Ka [A ] (6 －3) 1 X X 或者写成： lg PH lg K a (6 －4) 1 X 根据上式可知，只要测定溶液的 PH值及溶液中的 [HA] 和[A －] ， 就可以计算出电离平衡常数 Ka。 在极酸条件下， HA未电离，此时体系的颜色完全由 HA引起，溶 液呈黄色。设此时体系的消光度为 D1 ；在极碱条件下， HA完全电离， －