产品无菌检验规程.pdf

文件编号 版本 V1.1 文件名称 产品无菌检验规程 页码 第 1 页 共 3 页 1 目的： 建立产品无菌检验的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2 适用范围： 适用于本公司产品的无菌检验。 3 依据 GB/T 14233.2-2005 《医用输液、输血、注射器具检验方法 第 2 部分 生物学试验方法》 《中华人民共和国药典 2015 版》通则 1101 无菌检查法 4 设备、用具与试剂 4.1 设备要求 百级洁净台、恒温培养箱、霉菌培养箱、压力蒸汽灭菌器 4.2 用具 试管及试管架、移液管（ 1mL ）、培养皿（ 90mm ）、洗耳球、剪刀、钢尺、镊子、酒精灯 4.3 试剂 硫乙醇酸盐流体培养基，胰酪大豆胨液体培养基，大豆酪蛋白琼脂培养基，纯化水， 75% 乙醇 5 试验前准备 5.1 培养基的制备 5.1.1 硫乙醇酸盐流体培养基： 准确称取 5.85g 硫乙醇酸盐流体培养基至干净的烧杯中， 加入 200mL 纯 化水，加热搅拌溶解后分装至试管中，不少于 15mL/ 支，每批产品分装数量为 10 支。 5.1.2 胰酪大豆胨液体培养基：准备称取 6g 胰酪大豆胨液体培养基至干净的烧杯中，加入 200mL 纯化 水，加热搅拌溶解后分装至试管中，不少于 10mL/ 支，每批分装数量为 10 支。 5.1.3 上述培养基分装后，在试管上做好标记，用牛皮纸包裹好试管塞，放入高压蒸汽灭菌器中进行 121℃灭菌 15min 。 5.1.4 灭菌后将两种培养基分别放于试管架上自然冷却，注意观察培养基的颜色，硫乙醇酸盐流体培养 基氧化层应为粉红色，且高度不得超过培养基高度的 1/5 。 5.1.5 大豆酪蛋白琼脂培养基： 准确称取 10g 大豆酪蛋白琼脂培养基至烧瓶中， 加入 250mL 纯化水加热 充分溶解后 121℃灭菌 15min ，待培养基于 45℃左右时，将其倾注于培养皿中 15-20ml 备用。 5.2 试验用器具准备 5.2.1 将试验用到的剪刀、镊子、移液管（ 1mL ）放入饭盒中进行 121℃灭菌 30min ，灭菌后备用。 5.3 人员、物料进入无菌检验室 文件编号 版本 V1.1 文件名称 产品无菌检验规程 页码 第 2 页 共 3 页 5.3.1 人员进入无菌检验室按照《洁净间人员净化管理规范》执行。 5.3.2 试验用器具、试剂、样品灭菌后放入传递窗紫外灯照射 30min 后进入无菌检验室。 5.4 无菌检验环境要求 5.4.1 无菌室在使用之前进行臭氧消毒。 5.4.2 试验开始前对百级工作台进行紫外照射 30min 。 5.4.3 无菌检验过程中检查百级工作台中的空气菌落数：每次操作时在台面的左中右位置摆放三个大豆 酪蛋白琼脂培养基平皿， 打开平皿盖在空气中暴露，至试验结束， 盖好进行培养。 3 个平皿上的菌落数 平均不超过 1 个。 6 试验步骤 6.1 样品数量 每个灭菌批随机抽取 3 个样品进行无菌检验。 6.2 无菌检验方法 直接接种法：取待测样品的关键部位，裁剪成一个 2cm ×3cm 的碎片，然后接种于两种培养基中 进行培养，