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机能实验 —传出神经系统药物对离体肠肌的影响 机能实验 —传出神经系统药物对离体肠肌的影响 实验目的 1、掌握离体平滑肌的实验方法。 2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用 教学时数 2 学时 实验原理 一、 离体实验 1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量 药物的筛选。 3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。 (1)温度：38± 0.5 C ( 2)通氧气： 1 － 2 气泡 /s ( 3)营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不 同。 二、离体肠管实验 1 、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择 ( 1 )小肠：十二指肠、空肠、回肠 ( 2 )自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。 ( 3)空肠多做定性实验，回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理 (1)受体：家兔小肠平滑肌上存在 a、B、M受体。 (2)作用：α β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张； M受体兴奋可使小肠 平滑肌兴奋而收缩。 3)药品对受体的作用： 1、 氯化乙酰胆碱（Ach）: M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋 M受体，使小肠收缩 幅度增加，蠕动加强。 2、 阿托品（AtrO） : M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用， 可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。 3、 氯化钙（Bacl 2）:①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，② Ba2+ 可使细胞膜发生去极化。所以加入 BaCl 2肠管会发生强直性收缩，Bac∣2 并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。 实验材料 1 ．动物：家兔 药品①5X104氯化乙酰胆碱 0.5 %硫酸阿托品 20 ％BaCL2 3、 器材：RM624（多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张 力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“ L”型通气钩、高位吊瓶、量 筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、 注射器、台式营养器。 实验方法 一、 首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态. 此时肌张力测试调试完毕。 二、 调节仪器： 将超级恒温水浴温度调至38.5 ±0.5 C,向麦氏浴槽中加30ml台氏液，通 入氧气（1?2个气泡/秒）并制备家兔肠管标本。 三、 正式试验： 将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结 （约lcm小套），另一端穿 上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长 线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为 1 g,稳定标本20分钟。 在主菜单下按键选择 〈记录状态〉 ，先描记一段正常曲线， 然后按下列顺序给药。 向麦氏浴槽内加入 5X10-4MAch0.2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记,观察 肠段反应。当反应最明显时,用暂停键,将计算机转入“示波状态”。用台氏液 冲洗肠管 3 遍,稳定标本 15 分钟,加入下列药物。 将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加 0．5％阿托品 0．2ml 并作标记,观察曲线变化, 1 分钟后加 5X10-4MAch0．2ml 并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管 3 遍。稳定标本 15 分钟 将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加 0. 01 ％Adr0.1ml 并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管， 稳定标本，加下列药物。 将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加 20％BaCl2 0. 2ml 并作标记，观察曲线变化。 在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。 注意事项 1 、操作时应避免牵拉肠管，造成肠管活性不好。 2、 肠管两端穿线采用十字交叉法，肠管不易扭曲，便于营养液的流通。 3、 每次给药前均应冲洗肠管 3 次，中间间隔 1 分钟。 4、 BaCl2 可使肠管产生强直性收缩，不能恢复，所以最后加 BaCl2 。 5、 给药时将药液直接加入药液，不要碰线，也不要碰壁。 3 3 1aoQ02?o1040 O38温度0 10.0 20.0 频 率：17?∕? 最夭佰：2 1 a o Q 0 2 ?o 10 40 O 38温度 0 10.0 20.0 频 率：17?∕? 最夭佰：2 05e ?b值：O 3θf 平均值:0. 94? 30Fo 40.0 5Q.Q 降低溫廈 0 10.0 Zoo 300 频 率：2次/分 最犬值:25 83e 最小值:IS 42c 平均值:20. Tet 0 IorO 20.0 频 率