2013实验三、细菌芽孢及荚膜染色观察..docxVIP

-个芽袍形成一个细菌 -个芽袍形成一个细菌 实验三 细菌芽抱及荚膜染色观察 ＞实验目的： 1、学习并掌握芽抱及荚膜的染色方法; 实验芽砲是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽砲以及芽砲的形状、芽施在芽砲囊 内的位置，芽砲囊是否膨大等特征是 鉴定细菌的依据之一。科放芽笊 夕 f2 实验 芽砲是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体, 通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成 芽砲以及芽砲的形状、芽施在芽砲囊 内的位置，芽砲囊是否膨大等特征是 鉴定细菌的依据之一。 科放芽笊 夕 f 1=ifi十 由于芽砲壁厚.透性低.不易着色，用染料进行单 染色时，菌体和芽砲囊着色，而芽砲囊内的芽砲不着 色或仅显很淡的颜色。为了使芽苞着色便于观察，可 用芽胞染色法。 1= ifi 芽抱染色的原理是：用弱碱性染色剂孔雀绿，在加 热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽砲内， 进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽砲一经着色难 以被水洗脱。当再用对比度大的复染剂染色后，芽砲 仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽胞囊被染成复染剂 的颜色，使芽砲和菌体更易于区分。 恿当稀怎毛連察輕齿I; 恿当稀怎毛連察輕齿I;扇S佃咸卅空淡莎"圖 分为多糖或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱.不易着色. 易在用水冲洗时被除去，所以通常用衬托染色法染色,使菌 体和背景着色，而荚膜不着色，在菌体周围形成一透明圈， 由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响 观察。 三、实验材料； 菌种：苏云金芽砲杆菌、钾细菌 染色剂：5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液; 石炭酸复红，黑色素等 菌体 菌体 方法： ）.芽抱染色 K制片：涂片-干燥-固定 2、染色：加数滴孔雀绿染液于涂片上，用木夹夹住载 玻片一端，在微火上加热至染料冒蒸气并开始计时，维 持5min （其间补充染液防蒸干）。 ） 缓流水洗 | 复染：用番红染液复染2分钟。 缓流水洗、干燥 | 镜检：用油镜观察（芽砲呈亮绿色，菌体呈红色，或 可观察到伴砲晶体） 3. 4、 5. 6x 芽抱 染色 染色 1、制片：取一滴无菌水于载玻片上，用接种环取 钾细菌在水滴中，制成涂片，晾干。（不可加热! 2、染色：用石碳酸复红染色液染色3-4分钟，用水 轻轻冲洗，晾干。 3、刮片：在玻片一端加一小滴黑色素，另外取一 块干净的载玻片与黑色素接触，将黑色素在涂片上 轻轻刮过，形成一薄层，自然干燥。 4、镜检：菌体呈红色，荚膜无色，背景灰色。  五、实验结果： 1、绘图表示芽抱杆菌的形态特征。 2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和荚膜的形思考题: 2、绘图说明你所观察到的细菌的菌体和荚膜的形 1、为什么芽砲染色要加热？为什么芽砲及营养体 能染成不同的颜色？ 2、组成荚膜的成分是什么？涂片一般用什么方法 固定，为什么？