微生物实验设计［新版］.ppt

我们的思路 一、题目分析 二、实验设计 三、解题总结 ...... * 一、题目分析 某细菌肥料是由相关的 组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。 的多少是质量好坏的一个重要标志之一，请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量？在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性，应该注意那些操作步骤？ 从题目我们可以看出该题目的要求是 ； 因此，必须考虑以下几个问题： 不同微生物 活菌数 检测单位质量细菌肥料中的活菌数 减少实验误差 ...... * 1、该细菌肥料中的不同微生物 通过查找资料我们了解到细菌肥料，一般有 、 、 、 和 等分成。由此，我们推断该细菌肥料中大概有 、 和 。 瘤菌剂 固氮菌剂 磷细菌剂 抗生菌剂 复合菌剂 细菌 真菌 放线菌 有哪几种？ ...... * 2、如何 这些微生物？ 选择性培养基培养； 用平板分离法分离。 分离纯培养 ...... * 3、怎样 采用平板培养计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确结果。 要求样品成分混匀，保证每个活细胞都能分别形成菌落；尽可能选用选择性培养基，保证计数菌落围有效菌落。 减少实验误差？ 解决方法： ...... * 思考之后 鉴于，以上几点我们综合考虑，最终决定采 用 分离纯化微生物并测定样品中活菌数。 稀释涂布平板法 ...... * 二、实验设计 1、实验目的 2、实验原理 3、实验过程 ...... * 1、实验目的 检测单位质量样品细菌肥料中的 。 活菌数 ...... * 2、实验原理 ，分离培养样品中的不同微生物。不同的培养基，由于营养成分不同，因此具有选择性，适合改培养基的微生物就可以生长；反之，则不能生长，根据不同的选择培养基，我们可以分离出样品中的不同微生物。 ，是种统计物品含菌数的有效方法。方法如下：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。 利用选择培养基 平板菌落计数法 ...... * 3、实验过程 （一）样品的处理和稀释 （二）培养基的配置及倒平板 （三）涂布 （四）培养 （五）计数和报告 ...... * （一）样品的处理和稀释 1.以无菌操作取检样10g，放于盛有90ml灭菌蒸馏水的灭菌三角瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分研磨、摇床震荡制成1：10的均匀稀释液。 2.用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌蒸馏水稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。 3.另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。 ...... * 操作示意图： ...... * 【注意1：样品稀释误差】 1、为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。 2、在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。 3、为减少稀释误差，最好采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。 ...... * （二）培养基的配置及倒平板 1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用) 2、高氏I号培养基（培养放线菌用） 3、马丁氏琼脂培养基（分离真菌用） ...... * 倒36个培养皿 操作图 ...... * 【注意2：倒平板误差】 1. 倒平板时倾注培养基的量规定不一，从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。 2.为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混