小分子荧光探针简介肖康.ppt

0) 小分子荧光探针简介(一) 肖康 Evanston only. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 目录 发光原理及发光类型 二、常见的几种荧光机制 三、小分子荧光探针案例 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 发光原理及发光类型 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 什么是荧光及发光原理 内转换 内转换 发光( Luminescence) 动池豫 系间跨越 荧光( Fluorescence 磷光( Phosphorescence) 化学发光( (chemiluminescence)能 T17 发 1、荧光 吸 发射荧 外转换 种光致发光的冷光现象 收 磷振动弛豫 经入射光照射,外层电子从基 态跃迁到激发态,当恢复到基 态时能量已光能形式释放,成 为荧光。荧光寿命<108s。 磷光 种缓慢的光致发光的冷光现象。 磷光寿命≥108s。 3、化学发光 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 什么是荧光及发光原理 单光子发光 Excited ●最常见的发光方式 吸收一个光子,发射一个光子 符合 Stokes位移定律,红移 激发光波长小于发射光波长。 Ground 2、双光子发光 单光子 双光子 吸收两个光子,发射一个光子; 激发光波长大于发射光波长 ●反 Stokes定律,蓝移 上转换发光 ●掺杂稀土离子的化合物中 稀土金属独特光学性质; 反 Stokes定律,蓝移。 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 双光子荧光探针(Two- photon) a Single-photon excitation b Two-photon excitation昂贵的飞秒脉冲激光器 488nm 虚能级 需要很高激发光源强度和光子密度 1931年, Goppert-Mayer就在理论上预言了双光子吸收的存在; ●1990年,美国康奈尔大学Denk等将双光子激发现象应用到共焦激光扫描显微 镜中 ●荧光分子吸收第一个光子后,跃迁到虚能级上,该能级仅能存在几飞秒,第 二个光子必须在这几飞秒内与虚能级上的分子作用,从基态跃迁到激发态 Nat Rev Immuno. 2002. 2.872-880 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 双光子荧光探针(Two- photon) 。( Chem.Rev2015,l5,5014-5055 Valadon onry. ch Asposeslides for NET 4o dient P Evaluation only. Created with Aspose Slides for NET 4.0 dient Profilo 71 Copyright 2004-2017Aspose Pty L 双光子荧光探针(Two- photon) 单光子激发最大发射 双光子激发 solvent MeN 0.51 MeCN 60(51) 加加加加加 5