产品检验技术 产品检验技术 项目四任务6鸡新城疫疫苗效价检测.ppt

《产 品 检 验 技 术》 项目四 疫苗类产品的质量检验 一、任务分析、取样、建账 二、确定引用的国家、行业标准 三、鸡新城疫疫苗质量检验（一） 四、鸡新城疫疫苗质量检验（二） 五、鸡新城疫疫苗质量检验（三） 六、鸡新城疫疫苗质量检验（四） 七、数据处理与结果报告 任务六 鸡新城疫疫苗效价检测 知识目标 1.掌握鸡新城疫疫苗效价检测方法方法； 2.掌握HA、HI实验原理； 3.掌握结果判断方法； 技能目标 1.能进行红细胞制备； 2.会进行血凝实验操作检验； 3.能进行血凝抑制实验操作； 任务六 鸡新城疫疫苗无菌、毒素检验 职业素质目标 1.培养实事求是的工作态度； 2.培养科学严谨的工作作风。 任务完成方案 1.学生每5人一组按标准样品处理方案；5分钟 2. 教师指导学生正确的进行HAHI实验；40分钟 3. 教师指导学生正确的进行HI实验；45分钟 4. 教师指导学生正确的进行红细胞制备；45分钟 5.评价与总结、布置作业。30分钟 类型：国家标准 2010版《兽用生物制品检测规范》 附录24页 质量标准 第一阶段：教学内容 回顾病毒的结构？ 一、实验原理 来源 流感病毒 新城疫病毒 血凝素 来源 新城疫病毒可以凝集鸡红细胞，我们先把新城疫病毒加入反应孔中，然后再加入红细胞，静置一段时间后，会发现，反应孔中有凝集颗粒，这种现象叫凝集反应，称为血凝。 但这种血凝现象，可以被相应的抗体所抑制，如把新城疫病毒加入反应孔后，先加入新城疫抗体中和抗原， 然后 ，再加入鸡红细胞，此时，红细胞表面的受体就不能与抗原表明的凝血酶素直接接触，新城疫病毒对鸡红细胞的凝集能力受到抑制，这种现象称为血凝抑制。 二、实验材料 离心机、振荡器、微量移液器、新城疫标准抗原、新城疫病毒阳性血清、新城疫病毒阴性血清、待检样品、天平、微量振荡器、96孔微型反应板等 拍照片展示 配置1% 红细胞 配制四单位病毒 结果判定 血凝抑制试验 血凝试验 三、实验方法 1.配置1%红细胞 （1）首先用采血器按照抗凝剂与血1:4的比例吸取抗凝剂，翅静脉采血。 （2）抗凝血放入离心管中，加入生理盐水，放进离心机2000转离心三次，每次5-10分钟； （3）按照1%的比例将红细胞泥加入生理盐水中，制成1%的红细胞 2.血凝试验（HA） 用微量移液器在血凝板第一排的1~12孔依次加入25μl生理盐水。 在第1孔中加入25μl病毒抗原，反复吸取混匀后吸25μl到第2孔，如此倍比稀释直到第11孔，混匀后弃25μl；12孔为红细胞对照。 每孔补加25ul盐水 将1%的红细胞轻轻摇动混匀，在1~12孔中每孔加入25μl。 放置振荡器震荡，25℃静置40min后观察结果。 3.血凝试验（HA）结果判定及四单位病毒配置 1个血凝 单位 红细胞沉淀 4个血 凝单位 如：A排 结果： 1个血凝单位：第六个孔100%凝集，则1:26 4个血凝单位：第四个孔 四单位病毒的配置：将原标准病原液稀释26除以4倍,即稀释16倍。 B排结果：？