水质 浮游植物的测定 滤膜法检出限、显微镜校准、丝状体、似球形群体浮游植物细胞数估算.pdfVIP

附录A （规范性附录） 滤膜法检出限 附录A 给出了滤膜法检出限计算方法。滤膜法检出限与计数视野数、可计数视野总数 及子样本体积有关。假设样品在滤膜上符合随机分布，可通过泊松统计来确定其定量检测限 MDL 。MDL 计算公式见下式。 -lnα×n MDL = total V  n counted 式中： MDL—置信水平α 的方法检出限，单位：个/升或细胞数/升； α—置信水平，一般选择置信水平0.01 或0.05 ； ncounted— 参与计数的视野数，个； ntotal— 可用于观察的计数视野总数，个； V—样品过滤体积，L 。 8 附录B （资料性附录） 显微镜校准 B.1 目镜分划板 标定目镜分划板，以计算不同放大倍数下的计数视野面积。whipple grid 是一种网格型 目镜分划板，外观为刻有方格的玻璃圆盘，包含一个大格，大格被均分成100 中格，其中心 位置处格子又被均分成 25 个小格。Whipple grid 分划板详见图 B. 1。使用台测微尺标定 Whipple gird 分划板。镜台测微尺规格为1mm，均分成100 等分，每分格代表10 μm ，台测 微尺详见图B.2 。 图B.1 目镜测微尺 100div 图B.2 台测微尺 0.01mm/100Div B.2 Whipple grid 标定步骤 B.2.1 将whipple grid 刻度朝下装入目镜隔板上； B.2.2 将台测微尺放在显微镜载物台上，刻度朝上。先低倍对焦，使视野中台测微尺刻度清 晰； B.2.3 转动目镜，使whipple grid 与镜台测微尺刻度平行，移动载物台至两尺重叠，再使两 尺的“0 ”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度 之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。台测微尺每格长度10 μm ，在一定放大倍数下， 目镜测微尺的标定结果即每格的长度： 9 目镜测微尺每格长度= （台测微尺n 格×台测微尺每格长度）/与台测微尺重合的目镜测微尺 格数，将数据填入表B.1 。依据表B.1 完成表B.2 。 表B.1 Whipple grid 目镜分划板标定结果 目镜 物镜组合 次数n 大格/mm 均值 中格/ μm 均值 1 10X 10X 2 3 1 10X 20X 2 3 1 10X 40X 2 3 1 10X 4X