分解尿素的细菌的分离和计数(答案).docxVIP

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 一、 基础知识 尿素是一种重要的 氮 肥，农作物 不能 (能，不能)直接吸收利用，而是首先通过土壤中的 细菌将尿素分解为 氨和CO ，这是因为细菌能合成 脲酶 。 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 , 这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是人为提供 有利于目的菌株生长 的条件 (包括 营养、温度、PH 等)，同时 抑制或阻止 其他微生物生长 。 在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 稀释涂布平板 法。除此之外， 显微镜直接计数 也是测定微生物数量的常用方法。 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 1 个活菌。通过 统计 菌落数 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30?300 的平板进行计数。 5?统计的菌落数比活菌的实际数目 低 。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到 的只是 一个 菌落。因此，统计结果一般用 菌落数 来表示。 设置对照的主要目的是排除 实验组中非测试 因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 对照实验是指除了 被测试 条件外，其他条件都 相同 的实验。满足该条件的 称为 对照组 ，未满足该条件的称为 实验组 。 二、 实验设计 实验设计的内容包括 实验方案 、 材料用具 、 实施步骤 和 时间安排 等。 根据图示2-7填写以下实验流程： 性 增强 ，PH 升高 。因此，我们可以通过检测培养基 pH变化来判断该化学反应是否发生。 3?在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂。培养某种细菌后，如果 PH升 高，指示剂将变 红 ，说明该细菌能够 分解尿素 。 巩固练习 1?从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有 ①尿素②有机氮化合物③无机盐④有机碳化合物⑤水⑥无机碳化合物 3.土壤微生物主要分布在距地表 3?8cm的近中性的潮湿土壤中，约 70%?90%为 细菌 。 4?分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是 不同微生物在土壤中含量不同 。 培养不同微生物往往需要不同培养温度和时间。细菌一般在 30?37C 培养1?2d，放线 菌一般在 25 ?28C 培养5?7d，霉菌一般在 25 ?28C 的温度下培养 3?4d。 菌落的特征包括 形状、大小、隆起程度、颜色 等方面。 实验过程 取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要 灭菌 。 应在 火焰 旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有 90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。 在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 火焰 旁进行。 实验时要对培养皿作好标记。注明 培养基类型、培养时间、稀释度 等。 为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先 制订计划 。 三、结果分析与评价 1 ?对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 生物化学 的方法。 2?在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 脲酶 将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱 A (1) (3) (4) (5) B (2) ( 3) (4) ( 5) C (1) (3) ( 5) (6) D (2) ( 3) (5) (6) 2?可用于菌落数目统计的培养基是 A 固体培养基 B 液体培养基 C半固体培养基 D天然培养基 3?产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 A 一个细菌液体培养基 C 一个细菌 固体培养基 4.要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用 A加入青霉素的培养基 B 固体培养基 C液体培养基 B许多细菌 液体培养基 D许多细菌 固体培养基 加入高浓度食盐的培养基 5.右表资料表明在各种培养基中细菌的生长， SCM为简单培养，UVXYZ弋表 加入培养基的不同物质，问哪一种物质细菌不能合成 A. U B.V C.Y D.Z 6培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是( A含热量太多 B会使微生物失水 C导致微生物休眠 D培养基中的碳源和氮源比例失衡 7.不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是①菌落 大小②菌落形状⑶菌落的隆起程度④菌落的颜色⑤菌落的透明度 A ( 1) (2) 8.某同学在1 A 27600 (3) B (2) (3) (4) C (1) (3) (4) D 100、1000倍稀释液的平均菌落数为 (1) 0、 2760、 295、 B 29500 C 46000 D 37750 9.下列氮肥能被植物直接吸收的是 (1)硝酸盐⑵尿素⑶磷酸二氢氨 培养基 生长状态 SCM SCM + V +Z SCM+U+Y + SCM+Z+X SCM+v+Y + SCM+U+X SCM+Y+Z + ⑵ 46,则菌落总数为 (3) (4) ( 5)