实验四 甲醛滴定.pptVIP

实验九 甲醛滴定法 一、原理： 用甲醛处理氨基酸，甲醛与氨基结合，形成羟甲基衍生物，不仅相对增强了NH3＋的酸性解离，而且降低了氨基的碱性。 NH3＋上的H＋游离出来，就可用碱来滴定，测出氨基氮，从而计算氨基酸的含量。 如果样品中只含有某一种已知的氨基酸，从甲醛滴定的结果可算出该氨基酸的含量。如果样品是多种氨基酸的混合物（如蛋白水解液），则滴定结果不能作为氨基酸的定量依据。 甲醛滴定法常用来测定蛋白质水解程度，随着水解程度的增加，滴定值增加。当水解完全后，滴定值即保持恒定。 二、操作： 将3只100ml锥形瓶标以０、1、2号。 1、2号瓶内加甘氨酸（约1%）2.0ml及水5.0ml； 　０号瓶内加水7.0ml。 再向3只锥形瓶中各加中性甲醛溶液 5.0ml、0.5%酚酞乙醇溶液4滴． 然后用标准0.100mol/lNaOH滴定至微红色。（pH=8.7~9.0）。 三、数据记录及处理： 　　　 　　　　（ V-V0）×1.4008 m＝ 2 注： m：1ml氨基酸溶液中含氨基氮的质量。 V：滴定样品时消耗NaOH溶液的毫升数； V0：滴定空白时消耗NaOH溶液的毫升数。 1.4008 ：每ml0.100mol/lNaOH溶液相当的氮质量 注意： 　甲醛及氢氧化钠有腐蚀性，操作时注意； 　碱式滴定管的使用方法，以及计数方法，读数保留小数点后两位． 五、注意事项 利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。随着蛋白质水解度的增加，滴定值也增加，当蛋白质水解完成后，滴定值不再增加。 六、实验报告 根据滴定结果，总结分析此法在实际应用中的优缺点。 七、思考题 为什么氢氧化钠溶液滴定氨基酸的—NH3+基上的H+，不能用一般的酸碱指示剂？ * * 水溶液中的氨基酸为两性离子，不能直接用酸、碱滴定。因为氨基酸的酸、碱滴定的终点pH值或过高（12-13）或过低（1-2），没有合适的指示剂可被选用。 当溶液中存在1mol/l甲醛时，滴定终点由pH12左右，降至pH9附近，即酚酞指示剂的变色区域。