真菌DNA大量提取精品资料.pdfVIP

核裂解法大量提取真菌 DNA 一、试剂的配制 （0.1 M ）：称取 3.72 g Na 1. EDTA-Na2 2EDTA·2H2O，用超纯水定容至 100 mL。 2. Tris-HCl （1 M ，pH ）：称取 12.11 g Tris-HCl ，用 90-95 mL 超纯水溶解，调 pH 至 8.0 后，在定容至 100 mL。 3. 核裂解液 (10 mM Tris-HCl,400 mM NaCl ，2 mM EDTA-Na 2 ，0.8 mM 盐酸胍 )： 分别称取 76.43 g 盐酸胍， 23.38 g NaCl 于 1 L 烧杯中，加入灭菌超纯水充分 搅拌溶解至 900 mL，再加入 10 mL 1 M Tris-HCl 和 20 mL0.1 M EDTA-Na 2 ， 搅拌溶解，调 pH 至 8.0，定容至 1000 mL，高温灭菌，冷却待用。 4. SDS （20% ）：称取 20 g SDS，灭菌超纯水定容至 100 mL 。（SDS 不能采用