DB34∕T 3307-2018 分子标记辅助选择抗稻瘟病基因Pi1、Pi2的检测 PCR法.pdfVIP

ICS 65.020.99 B 21 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 3307—2018 分子标记辅助选择抗稻瘟病基因 Pi1、Pi2 的检测 PCR 法 Protocol for molecular marker assisted-selection of rice blast resistance gene Pi1 and Pi2 PCR method 文稿版次选择 2018 - 12 - 29 发布 2019 - 01 - 29 实施 安徽省市场监督管理局 发 布 DB34/T 3307—2018 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省种子质量监督检验站提出。 本标准由安徽省动植物检验检疫标准化委员会归口。 本标准起草单位：安徽省种子质量监督检验站、合肥丰乐种业股份有限公司、安徽省种子管理总站、 安徽出入境检验检疫局技术中心。 本标准主要起草人：周桂林、胡晓玲、吴晓亮、张文晓、周锐、周贤达、曹玉洁、范家萌、徐丽媛、 周红英、王凤杰、胡娜、宗凯、张奇、王兆贤、刘根、熊成国、王浩波。 I DB34/T 3307—2018 分子标记辅助选择抗稻瘟病基因 Pi1、Pi2 的检测 PCR法 1 范围 本标准规定了分子标记辅助选择抗稻瘟病双基因 Pi1 和 Pi2 的 PCR 检测方法。 本标准适用于抗稻瘟病分子标记辅助育种，以及水稻品种中稻瘟病抗源基因的分子鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 bp：base pair，碱基对 CTAB：cetyltrimethyl ammonium bromide，十六烷基三甲基溴化铵 DNA：deoxyribonucleic acid，脱氧核糖核酸 dNTPs：deoxyribonucleoside triphosphates，脱氧核苷三磷酸 PAGE：polyacrylamide gelelectrophoresis，聚丙烯酰胺凝胶电泳 PCR：polymerase chain reaction，聚合酶链式反应 SSR：simple sequence repeat，简单序列重复 Taq 酶：Taq-DNA polymerase，耐热 DNA 聚合酶 ddH2O：双蒸水（超纯水） 4 原理 根据水稻抗稻瘟病基因 Pi1、Pi2 在染色体上的位置和保守区序列，分别筛选两套特异性检测引物， 包括适用于抗稻瘟病分子标记辅助育种和水