动物细胞融合与单克隆抗体用[文字可编辑].pptVIP

专题 2 细胞工程 动物细胞融合与单克隆抗体 2002 年 12 月 30 日， 两场筹备了 10 年的“太 空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行， 植物细胞 “新人” — 黄花烟草 和 革新一号烟草 叶肉细胞 原 生质体 ， 动物细胞“新人” 是小鼠 B 淋巴细胞 和 骨髓瘤细胞 ，两批新人同时在 “产房” — 电融合 仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技 术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 A 细胞 B 细胞 人工诱导 1.1 动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂 交）：是指 两个或多个细胞 融 合形成一个 单核细胞 的过程。 一、动物细胞融合 1.2 动物细胞融合过程 为什么灭活的 病毒能作诱导剂？ 灭活丧失感染性 保留融合活性 细胞膜的流动性 灭活病毒、 PEG 、电激 等 融合后的细胞进行有丝分裂， 形成完整的杂交细胞 诱导的手段？ 融合后细胞的类型？ AB 杂种细胞遗传物质 有什么特点？ 结果 三种 AA 、 AB 、 BB （ A 、 B ） 含两种生物的遗传物质 1.2 动物细胞融合过程 原理？ 1.3 动物细胞融合技术的意义和应用 比较项 目 细胞融合 的原理 细胞融合的 方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂 交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶 去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用 胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外， 还有 灭活病毒 获得杂种 细胞、 制备 单克隆抗 体 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 【例 1 】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A. 离心 B. 灭活的病毒 C. 电刺激 D. 振动 【例 2 】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） A. 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B. 能无限增殖 C. 可形成新个体 D. 培养过程会贴壁 【例 3 】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A. 克服远源杂交不亲和 B. 制备单克隆抗体 C. 培育新物种 D. 生产杂种细胞 B B A 强调： 效应 B 淋巴细胞是 能够产生抗体的 B 淋巴细 胞，下文将其简称为 B 淋 巴细胞 抗体：能够与抗原发生特 异性结合的 免疫球蛋白 。 能产生抗体的细胞是 浆细 胞（即效应 B 细胞）。 二、单克隆抗体 B 淋巴细胞 效应 B 淋巴 细胞 记忆 B 淋 巴细胞 分化 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的 血清 中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗 体的特异性差、灵敏度 低。 单克隆抗体！ 读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的 B 细胞 可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个 B 细胞只 分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的 单一抗体，必须用单个 B 细胞进行无性繁殖，即克隆。 2.1 单克隆抗体的概念 ? 单克隆抗体：单个 B 细胞克隆产生的 化学 性质单一、特异性强 的抗体 提示 1 ：对 B 细胞进行细胞培养可行吗？ 提示 2 ：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 问题： 如何大量生产单克隆抗体？请尝试设 计一个方案。 2.2 单克隆抗体的制备 一个 B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆 抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975 年英国科学家 米尔斯坦 和 科勒 的实验 ①为什么给小鼠注射特定的 抗原蛋白？ ② 会有几种融合方式？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出 来的？有何特点？ ④ 是否所有的杂交瘤细胞都 能产生专一性抗体？ ⑤ 如何大规模进行培养得到 大量的单克隆抗体？ BB 、 B 瘤 、 瘤瘤 （ B 、瘤） （一选） 选 择性培养基 ： 只有 杂交瘤 细胞 才能存 活 获得产生相应 抗体的 B 细胞 （二选）：选 能产生所需 专 一抗体的杂交 瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点： 既能产生特异性 抗体，又能大量 增殖。 单抗制备过程分哪几步？ 请用箭头把以下代表单克隆抗 体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺 序是？ 2.3 单克隆抗体的应用 诊断试剂 —— 最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点： 特异性强，灵敏 度高，并能大量制备。 “ 生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物 单抗导向，药物为弹头 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗 癌症治疗 ，单克隆抗体作为载体