康乃馨植物组织培养.pdf

. 康乃馨植物组织培养实验报告 08 级生物科学（ 2 ）班 刘姣姣 学号： 200840810217 . . 康乃馨植物组织培养 一、实验目的： 掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。 二、实验原理： 香石竹 （学名：Dianthus caryophyllus ）又名康乃馨 , 花色艳丽 , 开花时间长 , 装饰效果好 , 是世界上最畅销的切花之一 , 具有较高经济 价值 [1] 。由于病毒病侵害 , 常使植株矮化 , 花朵变小 , 花色产生斑点 , 退 色甚至不开花 , 影响切花产量和质量。 通过茎尖分生组织培养 , 能够获 得 “无病毒”的健康植株 , 对于引进的少而新的脱毒种苗 , 再进行一次 茎尖培养 , 进一步降低基础苗中的病毒含量 , 并通过组织培养的方法 快速繁殖 , 在短期内 , 就可以获得大量的脱毒试管苗 , 使引入材料迅速 在生产上推广应用 , 取得明显的经济效益。 三、实验仪器与材料： 仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、 不锈钢碟子、纱布、记号笔、标签纸 试剂： 75%乙醇、 0.1%升汞、无菌水、 MS培养基、 IAA 0.1mg/L 、 BA 0.5mg/L 、pH5.8-6.0 、蔗糖、琼脂 四、实验步骤： 培养基的配方 1、香石竹的生芽培养基 MS+ IAA (0.1mg/L) + BA( 2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+ 蔗糖（ 30g/L ） . . +琼脂 (8g/L) ，pH5.8-6.0, 配制 0.3L, 用小培养瓶分装 10~15瓶。 另外，需要制备无菌水 20 瓶（大培养瓶），每人 3~4 瓶，，纱布、 碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 2、香石竹的继代培养基 MS+ BA( 0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+ 蔗糖（ 30g/L ）+琼脂 (8g/L), pH5.8-6.0, 配制 0.3L, 用小培养瓶分装 10-15 瓶。 另外，需要制备无菌水 20 瓶（大培养瓶），每人 3-4 瓶，，纱布、 碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 3、香石竹的生根培养基 MS+生 根 培 养 基 为 1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗 糖 (30g/L)+ 琼 脂 (8g/L) ，pH5.8-6.0, 配制 0.3L, 用小培养瓶分装 10-15 瓶。 另外，需要制备无菌水 20 瓶（大培养瓶），每人 3-4 瓶，纱布、 碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 香石竹的生芽培养 1、无菌操作准备 将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，开紫外灯， 照射消毒 20-30min, 开送风开关，关紫外灯，通风