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生物样品的制备 生物样品的制备 生物样品的制备 生物样品的制备 体内药物分析简介 体内药物分析 生物样品的制备 生物样品的制备 体内药物分析 (三)自动化固相萃取技术(自动化SPE技术) 优点: ① 节约时间,400个/hr,确保了较高的工作效率; ② 减少了操作误差,提高准确度和精密度; ③ 安全性好,可避免人对有毒样品的接触。 缺点: ① 残留物对测定的影响; ② 在采用连续测定时,要考虑样品理化 性质的稳定性对测定的影响。 三、溶剂萃取法 (四)固相微萃取法(SPME ) SPME装置简单,类似于气相色谱微量注射器,其基本装置如图。 1. 压杆 2. 简体 3. 压杆卡持螺钉 4. Z形槽 5. 简体视窗 6. 调节针头长度的定位器 7. 拉伸弹簧 8. 密封隔膜 9. 注射针管 10. 熔融石英纤维 11. 熔融石英纤维 三、溶剂萃取法 固相微萃取方法分为萃取过程和解吸过程两步:①萃取过程—具有吸附涂层的萃取纤维暴露在样品中进行萃取;②解吸过程—将已完成萃取过程的萃取器针头插入气相色谱进样装置的气化室内,使萃取纤维暴露在高温载气中,并使萃取物不断地被解吸下来,进入后序的气相色谱分析。 (四)固相微萃取法(SPME ) 三、溶剂萃取法 SPME操作方法 SPME的特点:① 集采样、萃取、浓集、进样于一体,避免引入多步操作误差;② 无需萃取溶剂,样品量小、空白值小;③ 萃取选择性高;④ 纤维涂层(萃取头)可重复用上百次;⑤ 适用于分析挥发性和非挥发性物质;⑥ 与GC及HPLC、MS等联用,自动化分析。 目前SPME使用的固相涂层种类限制了它的应用,但该法极具前途。 (四)固相微萃取法(SPME ) 三、溶剂萃取法 6. 微透析技术(Microdialysis, MD) ——膜分离技术 利用膜透析原理,微量地对细胞液进行流动性连续采样的新型采样和色谱样品制备技术。 微透析技术可以用来研究生物体在活动时体液组成的一些变化。 微透析系统组成如图。 三、溶剂萃取法 * 体内药物分析 * MD的原理 : 用与细胞间液非常接近的生理溶液以慢速度(0.5~5?L/min)灌注由膜制成的微透析探针(置于需要取样的部位),膜内外待测组分的浓度梯度使其由膜外(生物体内)进入膜内(探针内),随灌注液(透析液)流出体外、进入仪器分析系统—如毛细管电泳、微柱HPLC。 6. 微透析技术(Microdialysis, MD) 三、溶剂萃取法 微透析技术是对清醒、自由活动动物的在体取样,具有以下的显著特点: ① 时间分辨性——可连续跟踪体内多种化合物量随时间的变化。 ② 空间分辨性——取样真实代表取样位点目标化合物的浓度。 ③ 同时取样——不同部位同时植入探针研究目标化合物的体内分布。 6. 微透析技术(Microdialysis, MD) 三、溶剂萃取法 微透析技术是对清醒、自由活动动物的在体取样,具有以下的显著特点: ④ 目标分辨性——提供不含蛋白质等 大分子物质的游离态小分子化合物,对药物研究具有重要意义。 ⑤ 不需处理——因样品不含蛋白质、酶等大分子物质,可 不经预处理直接用于测定。 6. 微透析技术(Microdialysis, MD) 三、溶剂萃取法 MD的应用: 药物分布研究——勿需处死动物,可获得完整的浓度-时间资料 药物代谢研究——可获得药物代谢中间过程的信息 药代动力学研究——勿需采血,避免因血容量减少对药物分布及消除的影响,药动学资料更准确 分析方法——色谱、GC-MS、LC-MS联用 6. 微透析技术(Microdialysis, MD) 三、溶剂萃取法 谢 谢 / THANKS 制作人:吴爽 * * * * * * * * * 生物样品的制备 生物样品的制备 生物样品的制备 生物样品的制备 体内药物分析简介 体内药物分析 生物样品的制备 生物样品的制备 体内药物分析 * * * * * * * * *
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