动物疾病诊疗技术 血液尿素氮测定 2.2.3血液尿素氮测定.docxVIP

学习资料单 PAGE 1 血液尿素氮测定 尿素是体内氨基酸分解代谢的最终产物之一。氨基酸经脱氨基作用生成氨，氨对动物机体具有毒性。肝细胞具有便氨生成尿素的作用，所以尿素的生成是肝脏的解毒功能之一。肝脏合成的尿素通过血液运输至肾脏，由尿液排出体外，所以血液中尿素的来源是肝脏，而去路是通过肾脏进行排泄，血液尿素氮是肾功能主要指标之一。尿素氮较易受饮食和肾血流量的影响。下面介绍二乙酰一肟法测定血液尿素氮的方法。 【原理】 在酸性反应环境中加热，二乙酰一肟分解成二乙酰和羟胺，二乙酰与样品中的尿素反应，生成红色的二嗪衍生物（称为Fearon反应），其颜色深浅与尿素含量成正比。反应中加入硫胺脲和硫酸镉，可提高反应灵敏度和显色稳定性。因二乙酰不稳定，故由试剂中二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。 【器材与试剂】 1．器材电子天平、离心机、分光光度计或自动生化分析仪、水浴箱、烧杯、容量瓶、三角烧瓶、试管、试管架、移液管、移液器、记号笔等。 2．试剂 (1)酸性试剂。取蒸馏水lOOmL加入三角烧瓶中，再向其中加入浓硫酸44mL和85%磷酸66mL，待冷却至室温后，分别称取硫胺脲50mg和硫酸镉2g置于其中，溶解后用蒸馏水定容1000mL。于棕色瓶内4℃条件下可保存半年。 (2)二乙酰一肟溶液。称取二乙酰一肟20g溶解于900mL蒸镏水中，溶解后加蒸馏水定容至1000mL。于棕色瓶内4℃条件下可保存半年。 (3)尿素标准贮存液(lOOmmol／L)。称取干燥纯尿素600mg溶解于lOOmL蒸馏水中，再加入0.lg叠氮钠防腐，4℃条件下可保存半年。 (4)尿素标准应用液（5mmol／L，相当于尿素氮14mg/dL）。取尿素标准贮存液5.OmL，加蒸馏水定容至lOOmL。 【测定方法】测定血清尿素氮的方法按表2—20进行。 表2—20血清尿素氦测定操作步骤 步骤 添加物质 总蛋白测定管 非蛋白氮测定管 标准管 空白管 1 二乙酰一肟溶液(mL) 血清(mL) 尿素标准应用液(n止) 蒸馏水(mL) 酸性试剂(mL) 0.5 0.02 0 0 5.0 0.5 0 0.02 0 5.0 0.5 0 0.02 0 5.0 0.5 0 0 0.02 5.0 2 混匀，置沸水浴中加热12min，置冷水中冷却5min，540nm或绿色滤光板光电比色，空白管调零，读取各管光密度 【计算】 【正常参考值】 部分动物血清尿素氮含量正常参考值：牛、马3.55～7.Immol/L;猪3.55～10.65mmol／L;绵羊2.85～7.Immol／L;犬1.75～lOmmol／L;猫5～11.45rnmol/L。 【临床意义】 消化道出血、甲亢、某些严重肝病、严重感染、应用肾上腺皮质类固醇药物和饮食中蛋白质含量过高，可引起血液尿素氮暂时性增高。 血液尿素氮增高可见于急慢性肾炎、重症肾盂肾炎、各种原因所致的急慢性肾功能障碍、心衰、休克、烧伤、脱水、大出血、肾上腺皮质功能减退、前列腺肥大及慢性尿路阻塞等。