《ROS和纤维化疾病 百度》.ppt

* 我们接下来评估了全身消融Glrx对肺纤维化发展的影响，并显示与野生型（WT）同窝仔相比，缺乏Glrx的小鼠中博来霉素或AdTGFB1诱导的胶原沉积更大（图2a，b和补充图2a，b）。正如预期的那样，博来霉素或AdTGFB1诱导的总体PSSG和Fas-SSG的升高在缺乏Glrx的小鼠中更为明显（图2c，d和补充图2c）， * * GLRX的增强表达导致蛋白质去谷胱甘肽化并保护上皮细胞免于凋亡19。为了解决Glrx升高的表达对纤维化发展的影响，我们用TetOP-Glrx转基因创建小鼠，其与CCSP-rtTA小鼠杂交以在肺上皮细胞中表达Glrx25。与WT同窝小鼠或仅具有CCSP-rtTA转基因（Ctr）的小鼠相比，表达暴露于博来霉素的肺上皮的Glrxin的小鼠显示肺中的PSSG（图2f）和Fas-SSG（图2g，顶部）减少。 * * 此外，与Ctr组相比，博来霉素介导的Casp3活性升高（图2h）和纤维化（图2i）在Glrx转基因小鼠中也较低。我们接下来将含有多西环素的食物的施用延迟到CCSP-rtTA / TetOP-Glrx转基因小鼠给药，直到施用AdTGFB1后14天，这是胶原蛋白升高的时间点。当在10天后评估时，上皮Glrx的延迟表达仍然导致较低的Fas-SSG（图2g，下图）和与Ctr组相比的纤维化（图2j）。 * * 我们接下来确定将重组WT Glrx（图3a和补充图4a-c）直接施用到具有现有纤维化的小鼠的气道中是否影响疾病进展。将WT Glrx直接施用于对照小鼠的肺中导致肺泡区域中Glrx升高，在支气管上皮细胞和空气空间内的细胞中也观察到更高的荧光（图3b和补充图5）。将Glrx（每3天6μg）施用到具有现有博来霉素诱导的纤维化的小鼠的气道中恢复了减弱的Glrx活性（图3c）和PSSG中的反向升高（图3d）。 * * 将Glrx（每3天6μg）施用到具有现有博来霉素诱导的纤维化的小鼠的气道中恢复了减弱的Glrx活性（图3c）和PSSG中的反向升高（图3d）。 Glrx的施用在接下来的13天内逆转博来霉素介导的羟脯氨酸升高（图3e）和升高的吡啶啉交联（图3f），表明胶原纤维的降解增强。 * * Glrx以剂量依赖性方式导致博来霉素介导的羟脯氨酸升高的逆转（图3g）。实质区域中胶原纤维的组织病理学评估显示，在第28天，Glrx减弱了由博来霉素诱导的胶原蛋白升高，尽管在该时间范围内组织中胶原和扭曲的一些升高仍然明显（图3h，i）。 * * 我们接下来在给予AdTGFB1后21天将Glrx施用到小鼠的肺中（图3j，k），这是检测到更高水平的羟脯氨酸的时间点（图3k）。 * * 肺纤维化表现在年龄55岁及以上的个体中，表明IPF是一种与年龄相关的疾病28,29。氧化还原机制与年龄相关的肺纤维化有关6。因此，我们讨论了较低的Glrx活性和较高的PSSG水平是否与年龄依赖性增强的肺纤维化易感性相关。与3个月大的小鼠相比，18或24个月大的小鼠的肺中Glrx活性较低（图4a），而幼稚动物的PSSG随着年龄的增长略微但没有显着升高（图4b）。博来霉素诱导的纤维化在老年小鼠中增强并持续30。博莱霉素在3个月大的小鼠中诱导的Glrx活性降低在18个月大的动物中更为明显（图4c），并且与18个月大的肺中羟脯氨酸含量相比与3个月相比相关 - 暴露于博来霉素的老鼠（图4d）。 * * 在给予博来霉素后21天开始给予18个月大的动物的重组Glrx进入气道，导致肺组织中较高的Glrx活性，较低的PSSG和较低的胶原含量在21天后评估（图4e-g）， * * WT Glrx（但不是突变体Glrx）导致具有博，同时降低Vim和Acta2的mRNA表达，Cdh1的较高表达（图4h）和较低的Casp3活性（图4i）。 C23S突变体Glrx不影响肺组织中的Glrx活性和PSSG（图4e，f），略微影响Cdh1，Acta2和Vim表达（图4h）并且不影响Casp3活性（图4i）。与图3k中的发现一致，突变体Glrx不影响具有博来霉素诱导的纤维化的老年小鼠中的羟脯氨酸（图4g），证明Glrx的催化活性是其减轻肺纤维化的能力所必需的。 Glrx介导的Vim和Acta2 mRNA的减弱以及Cdh1的升高表明上皮-间充质平衡的恢复，但没有解决Glrx如何逆转现有的纤维化。因此，我们解决了用Glrx处理的肺组织的胶原降解活性。 WT Glrx（但不是突变体Glrx）导致具有博来霉素诱导的纤维化的老年小鼠中胶原酶活性的激活（图4j和补充图8a，b）。这些发现以及Glrx介导的吡啶啉交联的升高（图3f）表明Glrx对促进细胞外基质降解的潜在影响。 来霉素诱导的纤维化的老年小鼠中胶原酶活性的激活 * * 模板来自于 * 文献报告 文献报告 Q & A 提问答疑