《实验一 显微镜使用和简单染色》.pptVIP

实验一 显微镜使用和简单染色 实验内容 细菌简单染色与显微镜的使用 细菌革兰氏染色法及细菌形态和特殊结构特征 观察酵母菌形态及放线菌的形态 食品中常见霉菌形态特征观察 培养基的配制与灭菌 稀释平板计数及酵母菌的分离与鉴定 酵母菌的纯培养与酒精发酵 血球计数板的使用及运用 明胶液化、淀粉水解等生化试验 乳酸细菌的培养与酸牛奶的制作 微生物细胞大小的测量 独立实际操作考试 适用专业：食品科学与工程（含食科院 专业，东方食科专业，食科 教），食品质量与安全专 业；共9个班。 《食品微生物学实用技术》课程考试方法与计分标准 一、理论题考试（笔试，20分）：考试时间15min。 两道题：Ｉ型题（基本原理与概念等）１个，满分为12分； Ⅱ型题（培养基成分与功用）1个，满分为8分。 （均采用抽题方式，各人题目内容均不一样） 二、实际动手操作考试题( 单人独立操作，50分) ：考试时间45min。 革兰氏制片染色、显微镜使用与保养：满分35分；考试时间：25min。 菌种移植：满分5分；考试时间10min； 显微镜观察微生物的个体形态：满分5分；考试时间5min；细菌1个、放线菌1个、霉菌3个。 菌落识别：满分5分；考试时间5min。细菌1个、酵母1个、放线菌1个、霉菌2个 三、平时成绩（ 30分） 包含：实验报告的份数与质量(满分20分)；实验课中操作动手的态度、力度与到课率(满分10分)。 四、考核时间（3个学时） 最后一次实验课全班同学在实验室分组进行第一题和第二题考试， 由四位老师监考，当场不进行重考。 实验报告书写和实验要求 1. 一个实验技术内容写一份报告。 2. 实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验结果，强调的是不能将书本上的搬到实验报告中，必须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映在你的报告中。 3. 要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显微镜看到的视野，标明菌名、放大倍数等。 大肠杆菌 100×10 4. 实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打扫干净，并放回原处，保持实验室整洁，每次实验全班留4位同学打扫实验室卫生。 实验一 细菌简单染色及显微镜使用 一、目的要求 学习并掌握显微镜油镜的使用技术。 学习微生物涂片，简单染色的基本方法及无菌操作技术，通过显微镜观察,掌握细菌的个体形态。 二、实验原理 (一)油镜的工作原理 1.增加照明亮度：油镜与玻片之间加入与 玻璃的折射率（n=1.55）相仿的镜油（ 常用香柏油，n=1.52）,减少光线折射； 2.增加显微镜的分辨率： 分辨率（最大可分辨距离）= λ/2NA (二)染色的原理 只用一种染料（结晶紫或石炭酸复红），是细菌着色，与背景形成鲜明的对比，便于在显微镜下观察细菌的一般形态构造。 a干燥系 b油浸系 三、器材 1. 器材：显微镜，香柏油，二甲苯，擦镜纸 ，载玻片，接种 环，酒精灯。 2. 菌种：细菌标本片；金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌斜面菌 种。 3. 染色液：石炭酸复红溶液、蒸馏水。 四、操作方法 （一）本室显微镜的结构介绍 (二)显微镜的油镜使用 1. 调节光照 2. 低倍镜观察 3. 油镜观察 4. 细菌形态描绘 5. 显微镜的保养 1目镜 2镜筒 3镜臂 转换器14 物镜13 聚光器11 光圈10 光源9 镜台12 8底座 4标本移动器 7细调节器 6粗调节器 5粗调限位器 普通光学显微镜结构图 螺旋菌 螺旋体 弧菌 短杆菌 梭状芽孢杆菌 长杆菌 细菌个体形态图 (三)简单染色步骤 涂片 干燥 火焰固定 染色 镜检 水洗 干燥 冷却 棉塞