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实验六 VC含量测定 实验六 Vc含量测定  ------2，6-二氯酚靛酚法 学习定量测定维生素C的原理和方法 掌握滴定管基本操作过程 实验目的 Vc是人类营养中重要的维生素之一，绿色蔬菜和水果中含量很丰富。Vc有强的还原性，在碱性、加热并有氧化剂存在时Vc易被氧化破坏。2,6-二氯酚靛酚在碱性溶液中为蓝色，在酸性溶液中为红色，被还原后变为无色。因此可用2,6-二氯酚靛酚测样品中的Vc含量， Vc可将染料还原为无色同时Vc被氧化成脱氢Vc，Vc全部被氧化后，滴入的染料使溶液呈淡粉红色。根据消耗染料的量可计算出样品中Vc的含量。 实验原理 实验仪器、试剂和材料 仪器： （1）天平 （7）量筒 （2）研钵 （8）漏斗 （3）5ml微量滴定管 （9）滤布 （4）50ml容量瓶 (10)吸量管 （5）10ml胖肚吸管 （6）100ml锥形瓶 试剂： （1）1%草酸溶液：称取10g草酸，加水至1000ml； （2） 2%草酸溶液：称20g草酸，加水至1000ml； （3）Vc标准液：准确称10 mg Vc溶于100 ml 1%草酸中，即Vc的浓度为 0.1 mg/ml； （4） 0.05 % 的2，6 - 二氯酚靛酚溶液：称取2，6-二氯酚靛酚500mg，溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中，冷却后，稀释至1000ml，过滤于棕色瓶中，贮存于冰箱内。 材料： 柚子 操作步骤 1、提取Vc： 称取柚子10g~15g，加入15ml 2%草酸溶液，用研钵磨成匀浆。两层滤布过滤取得滤液，用少量 2% 草酸溶液洗研钵几次，倒入滤渣中，合并滤液，定容至50ml。（注意：切勿过量） 2、标准液滴定： 取Vc标准液4ml于100ml锥形瓶中，加 6ml 1% 草酸溶液，用2，6-二氯酚靛酚溶液 滴定至淡红色。记录所染料溶液的量，计算 出1ml染料溶液所能氧化Vc的量。 抗坏血酸浓度*消耗抗坏血酸体积 消耗染料体积 1毫升染料氧化Vc的质量= 3、空白滴定： 取10ml 1%草酸溶液放入锥形瓶中，滴定，方法同2中的操作，作为空白对照。 4、样品滴定： 另吸取两份10ml 样品，放入两个锥形瓶中，分别滴定，方法同2中的操作 。记录染料溶液所用的体积。 结果、分析讨论 取两份10ml 样品所用染料溶液体积的平均值， 代入下面公式计算100g样品中还原型Vc的含量： （V1-V2）×V总×M×100 V3×W Vc含量 (mg/100g) = V1：为滴定样品所消耗染料溶液的平均体积 V2：为滴定空白对照所消耗染料溶液体积 V总： 样品提取液的总体积 V3：滴定时所取的样品提取液的体积 M：1ml染料溶液所能氧化Vc的量（mg） W：样品的重量（g） 注意事项 1、样品提取过程避免与铜、铁接触，滴定过程要迅速，习题不超过2min，样品滴定消耗染料1~5ml为宜，如超出此范围，应增加或减少样品用量。 2、如果样品泡沫过多，可加几滴辛醇消泡。 3、样品中含有色素会干扰对终点的判断。 4、本法只能测定还原型Vc，不能测出具有相同生理功能的氧化型Vc和结合型Vc。 5、 用2%草酸溶液制备提取液可有效抑制Vc氧化酶，而1%草酸溶液无此作用。