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三、隔离和去雄 隔离 隔离的目的在于防止杂交用花受到非目的花粉的污染而发生非目的性杂交。 对于父本和母本上的花都要隔离。 一般在开花前一天套袋隔离。 去雄 去雄是摘除两性花作物母本花中的雄性器官,防止自花授粉。 一般在开花前1~2天进行。菜豆和豌豆一般在开花前3~5天。 去雄必须彻底而又不伤雌蕊。 四、花粉的制备 花粉的采集 花粉的贮存 生活力检验 ⒈花粉的采集 在授粉前一天摘取次日即将开放的花蕾,带回室内。 取出花药,在干燥条件下促使花药开裂,收集花粉备用。 ⒉花粉的贮存 花期不遇、异地采粉时需要进行花粉的贮存。 花粉一般在低温、干燥、黑暗条件下贮存。 ⒊花粉生活力的检验 形态检验法 畸形、皱缩的花粉无生活力 化学试剂染色检验法 过氧化氢、联苯胺和α-萘酚染色:具有活力的花粉粒含有活跃的过氧化物酶,此酶分解过氧化氢使多酚及芳香族胺发生氧化而产生红色。 I-K2I染色:发育正常的花粉积累较多淀粉,遇碘呈蓝色。 氯化三苯基四氮唑染色法:氧化态的四氮唑(TTC)无色,渗入到活的花粉粒后,作为花粉粒呼吸作用过程中产生的氢的受体还原成红色的还原态的TTC。 培养基发芽检验法 蔗糖、琼脂培养基保湿培养,加入硼酸可促进花粉萌发,然后镜检。 五、授粉 将父本花粉授在母本柱头上。 大多数蔬菜作物是正在开花的雌蕊和花粉的生活力最强,此时授粉可以提高杂交结实率和杂交种子数量。 少量授粉可以直接用正在散粉的父本雄蕊碰触母本柱头,也可用授粉工具沾取花粉涂抹到母本柱头上。 更换父本时,应用70%的酒精消毒授粉工具、手指等。 六、标记和登记 授粉后应在母本花上挂牌标记。 组合名称 株号 授粉日期。 应将相关内容登记到记录本上 七、授粉后的管理 杂交后的最初几天内应该检查隔离物,如果脱落、破碎就有可能发生了意外的杂交,这些杂交就无效了,应该重新补作杂交。 雌蕊有效期过去后,就不可能发生意外的受精,应该及时除去隔离物,一般是在授粉后5~7天去袋。 经常检查标牌,字迹不清的要重写,牌子丢失要补挂。 加强母本种株的栽培管理,如提供良好的肥水条件,及时防治病虫,及时摘除没有杂交的花果等,保证杂交果实发育良好。 八、杂交种子的收获与贮藏 果实达到生理成熟时,应及时采收杂交果实,特别是十字花科芸薹属、豆科、百合科、菊科等,其成熟种子易于裂果、落子、更要注意及时采收。 在收获过程中要严格防止不同杂交组合的错乱和混杂,并在标签上写上收种日期。 种子脱落后晒干,注意不要暴晒,然后装入种子袋中,袋外写明组合名称,袋内放入相应的标签。 所有的杂交种子贮存在低温、干燥、防虫、防鼠的条件下。 第五节 杂种后代的处理 杂种后代的培育 杂种后代的选择 一、杂种的培育 提高杂种实生苗的成苗率 培育条件应均匀一致 培育条件应与育种的主要目标相对应 二、杂种后代的选择 ㈠ 系谱法 ㈡ 混合法 ㈢ 单子传代法 ㈠ 系谱法 F1代 F2代 F3代 F4代 F5代及其以后时代 1、F1代 分别按杂交组合播种,每组合大约播种几十株。 根据组合表现淘汰很不理想的组合,中选组合内一般不进行株选,只淘汰假杂种和个别显著不良的植株。 如果是对于多系杂交的F1和异花授粉作物品种间杂交的F1,在F1即出现性状的分离,则F1代播种群体要增大,并且从F1代起,在优良组合内就进行单株选择。 2、F2世代 F2代是性状强烈分离的世代,这一世代种植的群体规模要大,以保证F2代能分离出育种目标期望的个体,一般播种几百株到上千株, 对F2代先进行组合间比较,淘汰平均综合表现较差、而又没有突出优良单株的组合。 从入选组合中根据质量性状和遗传力高的性状进行选择。 ⒊F3代 F2代入选优良单株分别播种成株系,开始对产量等遗传力低的数量性状进行系统间比较选择,按主要经济性状和一致性选择优良系统。 在入选系统内针对仍在分离的性状选择单株。 ⒋ F4代 F3代入选优良单株播种成株系,来自F3代同一系统的F4代系统为一系统群,同一系统群内各系统为姐妹系。 在F4首先比较系统群优劣,从优良系统群中选择优良系统,再从优良系统中选择优良单株。 F4开始出现稳定的系统,优良系统去劣混收,升级鉴定。 优良稳定的系统群中各姐妹系如果表现一致,可按系统群去劣混收,升级鉴定。 5、F5及其以后世代 F5多数系统已经稳定,所以主要进行系统的比较和选择。首先选出优良系统群,从优良系统群中选出优良系统去杂去劣,混合留种,升级鉴定。如果优良系统群各姐妹系表现一致,在系统群中去杂去劣混合留种升级鉴定。 F5还不稳定的材料需要继续单株选择,直到选出整齐一致的系统为止。 对于异花授粉蔬菜作物为了加速系统纯化,并防止自交导致的生活力衰退,还可采用母系选择法、集团选择法等选择方法。 系谱法的优缺点 优点 基因型稳定的速度比较快; 容易追溯亲本来源
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