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首先我们得来说说染料法的原理能够结合在双链上面的荧光染料只有结合了双链才会发荧光而游离的不会发光游离的不发尢但是染料没有选择特异性就是只要有双链就会染上并发荧光如果使用的引物产生了非特异性扩增那么荧光强度就不是目的条带真实的强度因此会产生严重偏差融解曲线我们如何判断本次扩增的都是目的片段呢这就需要用到融解曲线在循环反应结束之后系统会进行测定融解曲线通常的方式就是从度加热到度然后每隔一定时间或者少于测定系统荧光强度随着温度的升高都解开双链都游离之后不发荧光荧光逐渐下降那么画出来一个个荧光强度和温度
首先我们得来说说染料法 SYBR Green的原理，SYBR Green能够结合在双链
DNA上面的荧光染料，只有结合了双链DNA，才会发荧光，而游离的不会发光。
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游离的SYBR Green不发尢
但是，染料没有选择特异性，就是只要有双链 DNA，就会染上，并发荧光。 如果使用的引物产生了非特异性扩增，那么荧光强度就不是目的条带真实的强度, 因此会产生严重偏差。融解曲线我们如何判断本次qPCR扩增的都是目的片段
呢？这就需要用到融解曲线。 在qPCR循环反应结束之后，系统会进行测定融
解曲线，通常的方式
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