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实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
【目的】
体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】
葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的
起因时,还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高
见于:糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少
见于:胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】
样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧
化物酶的作用下,将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定
的醌类化合物。
【器材】
紫外分光光度计,恒温水浴箱,移液器(枪),枪头,试管
【药品】
葡萄糖测定试剂盒,试剂盒主要成分与浓度:
试剂 主要成分 实验浓度
R1 葡萄糖氧化酶(GOD) ≥13000U/L
过氧化物酶(POD) ≥900U/L
R2 磷酸缓冲液(pH7.0) 100mmol/L
酚 11mmol/L
4-氨基安替吡啉 0.77mmol/L
葡萄糖标准液 5.55mmol/L(100mg/dl)
【样本】
新鲜无溶血血清。
1
【步骤】
将10ml R1与90ml R2混合均匀,即为工作液。
空白管 校准管 样品管
工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml
蒸馏水 0.01 ml —— ——
校准液 —— 0.01 ml ——
样品 —— —— 0.01 ml
分别混合均匀,37℃水浴10~15分钟 (避免太阳光直射),用波长505nm、
比色杯光径1.0cm,用空白管调“零”点测定各管的吸光度(A)值。
【计算】
【参考值】
血清/血浆:3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考,各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】
1.全国临床检验操作规程(第二版),主编:叶应妩,王敏三,1997,P616.
2 .Trinder P. Ann Clin Biochem ,1969,6: 24-27.
血糖测定实验所需器材:
1. 紫外分光光度计(比色杯光径1.0cm),
2. 恒温水浴箱(能调温度的,37℃),
3. 移液器(枪)(规格1.0ml 6个,20µl 6个),枪头各100个
4. 试管50支,6个试管架
5. 烧杯100ml一个,50ml (或25ml)6个
6. 记号笔6 支
7. 蒸馏水1 瓶
2
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