感受态细胞吸收DNA分子三将目基因导入受体细胞牡丹江一中.ppt

基本操作序 AENA  产国国国pm国 基因工程的基本操作程序 必目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 操作讨程删F  生物材料 mRNA DNA 文包nR人AEDN4 基因组文库DNA文库 人工合成 获取目的基因 构建表达载体 三 导人受体相胞 得到转基因生物 第四 日的基因检测与鉴定 图1-6基因工程的基本操作流程图  目的善因的获取 即:将需要的基因从供体生物细胞内提取出来 目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因_ 供体生物细胞 目前被广泛提取使 取出 用的目的基因有:苏 云金杆菌抗虫基因 爹宗豁分植物抗病基因(抗病 毒、抗细菌)、人胰岛 素基因等。 目的基因  获得目的基因的方法 1)从基因文库中获取目的基因 1什么是基因文库? 基因组文库:含有一种生物的全部基因 种类: 部分基因文库(DNA文库):含有一种生物的部分基因 2怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因? 根据基因的有关信息:如基因的转录产物mRNA 2)利用PCR技术扩增目的基因 3)人工合成画  (〓)基因表达载体的构建—心 用一定的限制醯切割 质粒,使其出现一个切 取出质粒 取出DNA 口,露出黏性末端 用限制南切断DNA 2用同一种限制断目 用送接酶接且的基国 的基因,使其产生相同 的黏性末端 接酶 3将切下的目的基因片段插入质粒的切口处 再加入适量DNA连接形成了一个重组 DNA分子(重组质粒)  资 科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的 过程和不懈的努力,才获得成功。 起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体 质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基 因在棉花体内没有表达 然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗 虫基因首端),导入棉花受精卵,长成的棉花植株 还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫 基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入 棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力  基因表达载体的组成: a、目的基因 启动子 插人基因 b、启动子 表达载体 c、终止子 终止子 复制原点 d、标记基因 抗生素基因 e、复制原点 目的:使目的基因在受体细胞中稳定存 在,并且可以遗传给下一代,同时使目 的基因能够表达和发挥作用。  产国国国pm国 三)将目的基因导入受体细胞 常用的受体细胞: 动物细胞、大菌、土壤杆、桔行 将目的基因导入受体细胞的原理: 信鉴细菌病決綱胞射径 转化——目的基因进入受体细胞内,并且在受 体细胞内维持稳表过程  (三将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法國 导入植物细胞基因枪法 花粉管通道法 方法〈导入动物细胞一显微注射法■ 导入微生物细胞—感受态细胞吸收 DNA分子