逆转录聚合酶酶链反应中细节问题.pptVIP

逆转录聚合酶链反应中的细节问题  RT-PCR原理 AMMAN MMA(AY RNA Isolation /t AMMAn) Cells or Tissue CDNA synthesis oligo(di)arming AAAA周 A10ie0iA AMMIA GSP MMMM MAMA(Ah AAMANI PCR Amplification  介绍内容 口实验器具与材料 C试剂 口标本收集与保存 CRNA抽提 口递转录反应(RT) 聚合酶链反应(PCR)  、实验器具、材料 1、移液枪:1m1、200μ1、20μ1 2、吸头及吸头盒:1m1、200μ1、20μ1(无菌无酶,可直接购买) 3、EP管:1.5m1(无菌无酶,可直接购买) 4、PCR薄壁管0.2m1 5、普通EP管:1.5m1、0.5m1(高压灭菌) 6、大瓷缸:2个(180℃的高温干烤6h,灭活RNA酶,存放无酶EP管和PCR管 7、组织捣碎棒(可直接购买)  试剂 1、DEPC水500m1 2、75%乙醇:用无水乙醇DEPC水配,然后放4℃保存 3、异丙醇 4、氯仿 5、电泳缓冲液(TAE/TBE) 7、琼脂糖 8、Taq酶(含MgC12 Buffer),-20℃ 9、dNTP,-20℃ 10、随机引物,-20℃ 11、MMLV逆转录