质谱仪原理简介精析.pptVIP

什么是质谱仪? 质谱仪是按照离子的质荷比m/z)不同,来分离不同分子量 的分子测定分子量进行成分和结构分析 离子的生成方式有失去或捕获电荷(如:电子发射,质子化或 去质子化)  主要组成部分: 1进样部分 2.离子源 3质量过滤器(分析器) 4.离子检测器  离子源 质量过滤/分析器 进样部分 +++十 样品板 检测器 LC或GC +十 E源 Quadrupole 电子倍增器 FAB源 lon trap 闪烁计数器 MALD|源 Time-of-flight ES源  进样部分 要求: 大气压下的样品要进入高真空的质谱仪 而不影响仪器的真空度。 方式 进样板进样 进样头进样 毛细管进样(从气相色谱及液相色谱柱)  MALD激光解吸附离子源 MatrixcAssisted laser Desorption/onization MALD源的出现解决了生物大分子的离子化难题, 离子化过程与FB有相似之处。 使用基质,但基质为固体 2、MALD用脉冲激光束轰击样品和基质的共结晶。 对基质的要求是能吸收337nm紫外光并气化,能量 由基质传给样品使样品一起气化并离子化。  UV laserλ337nm MALDI plate+e 8 Mass analyzer Cocrystals o Analyte o Matrix  Time-of-flight Mass Analyser ■■■■■■■■■■■■■■ Pulsed laser beam I matrix and analyte ions = Cation te. q阳+orH ···●  常用基质 1、a氰基-4羟基一肉桂酸 CCA 多肽 2、3,5一二甲氧基-4一羟基肉桂酸SA蛋白 3、龙胆酸(2,5—二羟基苯甲酸DHB聚合物 4、吡啶甲酸 PA 5、3一羟基吡啶甲酸 3HPA MALD源由氮激光器产生短周期脉冲激光,产生的 多为单电荷离子,效率很高,即使只有极少的样 也可分析  常用基质结构 2, 5-Dihydroxy benzoic acid COoH 2-l4-Htydroxyphenylazoibenzoic acid N=N 3.5-DimethoKy-4-hydroxycinnamic acid Ho C=C.-COOH HaCO COOH CN  MALDI的优缺点 优点 缺 1、质量数可达300000Da 1、分辨率低 2、 attomole至 femtomole级灵 2、1000Da以下基质峰干扰 敏度。 3、激光解吸附离子化有可能使样 3、软电离方式,无或极少碎片 品光降解。 离子。 4、串联质谱功能较弱,除非接反 4、耐盐(样品含盐可达亳摩尔 射装置进行源后衰变测量 浓度) 5、不能分析非共价键相互作用。 5、适于分析复杂混合物。 6、定量时需要内校准。 7、如没有反射飞行装置,不能分 析多肽修饰 8、对各种赋形剂的容忍度低(如 含磷酸缓冲液,大于150mM的盐