姜黄素类化合物的功能性研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 姜黄是一种传统的多年生草本植物，历来可以药食两用，在我国的东南和西南 地区被广泛种植。由于具有通经止痛、驱寒消炎、散风活血等功效，且较多应用在 中药领域。姜黄素类化合物作为姜黄的主要活性成分，具有抗氧化、抑菌、抗炎及 抗癌降血脂、保护肝脏等作用，其作为一种天然染色素被广泛使用，且在化妆品行 业中也显示了较好的抗氧化和美白功效。由于姜黄素类化合物在健康领域具有重要 作用，市场对姜黄素类化合物需求越来越多，近年来将姜黄素类化合物应用于保健 食品中的研究也越来越多。本文主要是对来自河北省内的姜黄中提出的姜黄素类化 合物基于细胞模型抗氧化、抗癌活性以及小鼠体内保肝护肝的功效进行了探讨。主 要研究内容及结果如下： 根据以上的试验及其结果，本研究归纳总结出以下结论： （1） 建立了H O 刺激HepG 的细胞损伤模型，通过MTT 测定不同及剂量下 2 2 2 细胞的存活率的变化，结果表明，1mmol/L 的H O 刺激 1h 后，模型组的细胞存活 2 2 75.3 3.5 % 20mg/L 率仅为 （ ± ） ，随着加药浓度的增大细胞存活率增大，当浓度为 和 40mg/L 时，与空白组比较其细胞存活率几乎无影响。细胞形态的变化图可看出：将 H O 损伤HepG 细胞模型建立后，与空白组比较，模型组的细胞形态明显被破坏， 2 2 2 细胞浓缩变圆，发生了细胞凋亡，给药后的细胞的形态有所好转，当浓度为40mg/L 时细胞形态保持良好。通过对细胞ROS含量的测定，得出姜黄素类化合物可以减轻 损伤后的细胞内ROS 含量的增加，从而发挥了抗氧化应激的特性；通过对细胞内 SOD CAT GSH-Px H O 、 和 三种抗氧化酶活的测定，说明姜黄素类化合物能有效减缓 2 2 刺激细胞造成的氧化损伤，且与给药浓度呈剂量依赖关系，浓度为40mg/L 时三种 酶活抑制效果最明显。细胞内抗氧化的测定为后续的体内实验提供了理论依据。 2 HepG （）通过对细胞活性抑制率的测定得出，姜黄素类化合物对 2 细胞具有 显著的抑制作用且呈剂量和时效依赖性，当作用24h 时其IC50 值为129.02mg/L； AO 染色试验发现姜黄素类化合物作用于HepG 细胞后，能够破坏其细胞结构，发 2 挥促进细胞凋亡作用。通过细胞迁移抑制实验得出，迁移抑制作用与时间和剂量呈 正比关系，当给药作用72h，浓度为150mg/L 时，细胞划痕距离抑制作用达到90%。 随着加入姜黄素类化合物的浓度的不断增大，Hoechst 33258 染色后的HepG 细胞被 2 染色成高荧光强度明显增加；经不同给药浓度处理后的HepG2 细胞，其早期和晚期 凋亡的细胞数量均有所增加且呈剂量依赖性。给药浓度为50mg/L 、100mg/L 时活 细胞数比例为59.8%和35.3%，早期凋亡率40.1%和59.1%，凋亡率较为显著（p0.05）。 150mg/L 79.8% 7.9% 当浓度增加至 时，其早、晚期凋亡率为 和 ，促细胞凋亡的效果 I