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冰冻切片与漂片免疫组化以前做冰冻切片总是遇到问题后来查文献自己又做实验比较总算找到了又快又好地办法拿出来和大家分享一下取脑一定要在冰上操作液体也一定用冷的蔗糖一定要充分最好中间换液一次的可以不做沉淀后冻存一定要快冻最好在干冰上操作最重要的一点灌注的时候不要用用以前不知道很多书上写的都是后来自己用了发现还是有洞为了这个我还专门作了对照实验结果更好一些原因不知道为什么但是事实如此理论上高浓度液体更利于保护细胞不会因为冰冻损伤如果做磷酸化的抗体一定记得在灌注液里加一定的抑制剂如等蔗糖俺用的不用换液只要
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冰冻切片与漂片免疫组化
以前做冰冻切片 ,总是遇到问题 ,后来查文献 ,自己又做实验比较 ,总算找到了又快又好地办法 , 拿出来和大家分享一下 .
取脑一定要在冰上操作 ,液体也一定用冷的
30%蔗糖一定要充分 ,最好中间换液一次 , 20%的可以不做
沉淀后冻存 ,一定要快冻 , 最好在干冰上操作 .
最重要的一点 , 灌注的时候 , 不要用 0.1M PB, 用 0.01M PBS. 以前不知道 ,很多书上写的都是 0.1M PB, 后来自己用了 发现还是有洞 . 为了这个 ,我还专门作了对照实验 ,结果 0.01M PBS 更好一些 , 原因不知道为什么
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