分子生物学-10-1-第五章DNA重组回顾 基本操作技术-1细菌转化.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 第5章研究方法-5.1 重组DNA技术回顾 课程教案 授课题目：第5章 研究方法-核酸杂交-分子杂交-SNP-芯片 教学时数： 根据时间而定 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 1.了解重组DNA的技术历史发展史 2.了解各项技术的基本操作流程； 3.掌握各项技术的应用领域， 要求能够根据实际的问题情景分析出所用的技术是什么，目的是什么？还能应用于何种情况？ 教学重点： 重点阐明：核酸杂交的类型和原理 重点指出：southern 、 northern 、western blotting的流程 教学难点： 绝对难点：三个印迹的操作过程 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好  教学内容及过程 旁批 教学内容与教学设计：（第一课时） 最新进展之一：当年的 Nobel Prize in Physiology or Medicine 具体见课件 5.1 重组DNA技术回顾 两个概念 基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达。 基因工程技术是核酸操作技术的一部分，只不过它强调了外源核酸分子在另一种不同的寄主细胞中的繁衍与性状表达。 三大成就 40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题； 50年代提示了DNA的双螺旋结构模型和半保留复制机制,解决了基因的自我复制和世代交替问题； 50年代末至60年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说,成功地破译了遗传密码，充分认识了遗传信息的流动和表达 主要事件 1869 F Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离DNA。 1944 O.T. Avery证实DNA是遗传物质 1952 A.D. Hershey和M.Chase再次证实和噬菌体的遗传物质是DNA。 1953 J.D.Watson和F.H.C.Crick提出DNA分子结构的双螺旋模型。 M.Wilkins用X-射线衍射法证实了这一结构 1957 A.Kornberg从大肠杆菌中发现了DNA 1958 M. Meselson和F. W. Stahl提出了DNA的半保留复制模型 1959-1960 S. Ochoa发现RNA聚合酶和信使RNA，并证明mRNA决定了蛋白质分子中的氨基酸序列。 1961 Nirenberg破译了第一相遗传密码。 1961 F. Jacob和J. Monod提出了调节基因表达的操纵子模型。 1964 C. Yanofsky和S. Brenner等人证明，多肽链上的氨基酸序列与该基因中的核苷酸序列存在着共线性关系 1965? S. W. Holley完成了酵母丙氨酸tRNA的全序列测定； 科学家证明细菌的抗药性通常由质粒DNA 1966? M.W.Nirenberg，S.Ochoa、H.G.Khorana、F.H.C.Crick等人破译了全部遗传密码 1970 H.O.Smith，K.W.Wilcox和T.J.Kelley分离了第一种限制性核酸内切酶。 1970 H.M.Temin和D.Baltimore从RNA肿瘤病毒中发现反转录酶 1972-1973 H.Boyer，P.Berg等人发展了DNA重组技术，于72年获得第一个重组DNA分子，73年完成第一例细菌基因测定 1975-1977 F.Sanger与A.Maxam、W.Gilbert等人发明了DNA序列测定技术。 1977 年完成了全长5387bp的噬菌体φ174基因组 1978? 首次在大肠杆菌中生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。 1980 美国联邦最高法院裁定微生物基因工程可以专利化 1981 R. D. Palmiter和R. L. Brinster获得转基因小鼠； 1981 A. C. Spradling和G. M. Rubin得到转基因果蝇。 1973 美国斯坦福大学的斯坦利·科恩教授首次开发成功转基因技术 1982 美、英批准使用第一例基因工程药物--胰岛素； 1983 ?获得第一例转基因植物。 1984? 斯坦福大学获得关于重组DNA的专利。 1986 ?GMO首次在环境中释放。 1988? J. D. Watson