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凝血四项检查
APTT
【检验原理】
37℃下,在待检血浆中加入 APTT试剂,即以脑磷脂作为血
2+
小板的替代物加入贫血小板血浆中,在 Ca 的参与下,使纤
维蛋白原转变为纤维蛋白凝块,测定凝固所需要的时间,即
为待测血浆的 APTT。
【样本制备】
1. 采血与抗凝:采血后立即与抗凝剂充分混合,血液与抗凝
剂( 0.109mmol/L 枸橼酸钠)比例为 9:1。
2. 离心:抗凝血以 2500xg 离心 10 分钟,用微量移液器吸出
待测血浆。
3. 保存:血浆样本应立即测试。 22~24 ℃条件下保存,应 2
小时内测定, 2~4 ℃条件下保存,应 3 小时内测定。
【检验方法】
1. 仪器预热:开机,按照仪器使用说明书预热,达到要求稳
定温度,进入正常工作状态。
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。
2. 试剂配制:严格按照标示量加入蒸馏水复溶试剂,将试剂
瓶直立在 18~25 ℃中静置 30 分钟,使用前轻轻旋转试剂瓶
至完全溶解, 勿剧烈振摇。 氯化钙用前应放入仪器 37℃预温
槽。
3. 正常质控血浆制备:按照质控血浆试剂盒使用说明书。
4. 测定:以半自动高性能血凝仪为例:
①将测试杯置于预温槽中,用加珠器在每个测试杯中放一粒
钢珠。
②试剂放相应位置, 37℃预温,需混匀放搅拌子。
③将待测血浆 100 l (患畜或者质控血浆)加入测试杯,再
将 APTT试剂 100 l 加入测试杯,混匀,启动预温时间计时,
37℃, 5 分钟,将测试杯从预温槽移至测试槽。
④使用联动加样器加入氯化钙 100 l ,仪器自动启动计时器
开始计时并自动打印结果。
【正常值参考范围】
犬: 10.0 ~ 18.0 秒,建议各实验室建立自己的正常值参考范
围。
【检验结果解释】
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APTT延长见于FⅧ、FⅨ、FⅪ血浆水平减低。 APTT缩短
见于高凝状态、血栓性疾病。口服避孕药会影响检测结果。
PT
【检验原理】
在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和钙离子,使凝血酶
原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝
块,测定凝固所需要的时间,即为待测血浆的凝血酶原时间
(PT)。 PT 与血浆中的外源性凝血因子含量呈负相关。
【样本制备】
1. 采血与抗凝:采血后立即与抗凝剂充分混合,血液与抗凝
剂( 0.109mmol/L 枸橼酸钠)比例为 9:1。草酸钠、 EDTA、
肝素不适于作抗凝剂。
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。
2. 离心:抗凝血以 2500xg 离心 10 分钟。
3. 保存:血浆样本应立即测试。 22~24 ℃条件下保存,应 2
小时内测定, 2~4 ℃条件下保存,应 3 小时内测定。如不能
立即测试,应采样后 60 分钟内分离血浆。
【检验方法】
1. 仪器预热:开机,按照仪器使用说明书预热,进入正常工
作状态。
2. 试剂配制:严格按照标示量加入蒸馏水复溶试剂,将试剂
瓶直立在室温中静置 30 分钟
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