(完整word版)percoll分离液原理.docxVIP

） 原理 Percoll  是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低（  20mosm  ／ kg H２ O ） ,  粘 度也很小，可形成高达  1.3g  ／ ml  密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力（  200 ～ 1000g ）于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于 Percoll 扩散常数低，所形成 的梯度十分稳定。此外， Percoll 不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。 二）操作方法及注意事项 1.不同浓度（密度） Percoll 溶液的制备 : 先用 9 份 Percoll 与 1 份 8.5 ％ NaCl 或 1.5MPBS 混合达到生理性渗透压，然后用生理溶液（ 0.85 ％ NaCl 或 0.15M PBS ）稀释到 所需浓度。 Percoll 浓度（％） 70 60 50 40 30 20 比重 g ／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031 2.不连续密度梯度 Percoll 层的制备 : 先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处 理可使逐层叠加的 Percoll 液平稳沿管壁流下，使形成满意的界面。在制备过程中一般用长 针头注射器从高密度向低密度逐层放置，有时相邻两层 P