苯酚硫酸法测多糖含量.pdfVIP

一、硫酸苯酚法测多糖含量 1、试剂配制 1. 浓硫酸：分析纯， 95.5% 2. 5% 苯酚：取苯酚 5 g ，置 100 ml 容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕 色试剂瓶中，冰箱中冷藏储存备用。 3. 标准葡聚糖（ Dextran, 瑞典 Pharmacia ）或分析纯葡萄糖。准确称取 20m g 经 105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品于 500ml 容量瓶中，蒸馏水溶解定容。 2、制作标准曲线 准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖） 10mg于250ml 容量瓶中，加水至刻度，分 别吸取 0.2 、0.3 、0.4 、0.5 、0.6 、0.7 、0.8 及0.9ml ，各以蒸馏水补至 1.0ml ， 然后加入 5%苯酚 1ml 及浓硫酸 5.0ml, 摇匀冷却，室温放置 20min 以后于490nm测 光密度，以 1.0ml 水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光 密度值，得标准曲线。 1 2 3 4 5 6 7 8 0 标 准 葡 萄 糖 溶 液