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                马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养       马铃薯常用的鉴定寄主植物有苋科的千日红,茄科的洋酸浆、毛曼佗罗等。寄主植物应在无虫网室中培养。        2.鉴定寄主的准备 3.接种液制备及接种 放置防虫室中,一般5-10d可发病。 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 鉴定方法 取被鉴定植物幼叶1-3g 研钵中研磨,过滤 滤液中加少量500-600目金刚砂 棉花球醮汁液涂抹叶面2-3次 指示植物15-25 ℃培养 汁液涂抹法 嫁接接种法 指示植物检测 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养     通过茎尖培养只能得到很少的无病毒植株,而生产上需要数以万计的健康种薯。同时无病毒植株并没有对该病毒获得免疫能力,仍会在繁殖中再次侵染。如何在以后繁殖中防止受病毒再侵染是很关键的一环。 四、马铃薯无病毒株的繁殖和保存 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养  (1) 直接块茎繁殖 (2) 扦插繁殖 (3) 组织培养切段繁殖         A:继代培养         B:低温保存 繁殖方法主要有: 项目四  马铃薯脱毒与快繁 园艺技术专业教学资源库 模块五   植物脱毒与组培快繁技术 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养      项目四   马铃薯脱毒与快繁 1 2 3 4 5 CONTENTS 脱毒苗培育 马铃薯无病毒苗的鉴定 微型薯生产 原种种薯生产 马铃薯茎尖培养脱毒 马铃薯无病毒株的繁殖和保存 6 项目四  马铃薯脱毒与快繁 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 微型薯 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养   马铃薯营养繁殖时易受病毒浸染,当条件适合时,病毒就会在植株内增殖,转运和积累,随着世代传递,病毒危害逐年加重,一般造成减产50%以上。研究发现,有30多种病毒易感染马铃薯,并引起品种退化,严重影响马铃薯的生产。通过微茎尖组织培养技术能从马铃薯体内脱除PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒。 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养  1.脱毒种薯生产程序    用微茎尖组织培养法,诱导出苗,联免疫吸附法或指示植物法鉴定马铃薯病毒,经鉴定后无主要病毒的试管苗可定为脱毒试管基础苗。 二.马铃薯茎尖培养脱毒 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养    试管基础苗在无菌条件下,采用固体、液体培养基相结合的方法,进行扩繁基础苗,在防虫网室栽植或封闭温室扦插,生产出原原种(或称脱毒小薯)。   用原原种在一定隔离条件下产生原种1代,以后逐级称为原种2代、良种1代、良种2代。 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 2.取材和培养        多采用在室内发芽,芽经热处理(38℃)2周。然后取顶芽或侧芽1cm的茎尖,自来水冲洗干净,无菌条件下先用70%酒精浸润30s,再用2%次氯酸钠液浸4-5min,然后用无菌水冲洗3次。  马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养  消毒芽在解剖镜下仔细逐层剥去幼叶,露出圆滑的生长点,可留1-2个叶原基,0.2-0.3mm。 接种于液体培养基:MS +BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+ GA30.2mg/L +2%蔗糖,pH值5.8。 培养条件:21-25℃、2000-3000 lx、12h/d。3-6月长成2-3cm小芽。 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养   3. 继代和生根 脱毒苗经ELISA(试剂盒)鉴定后,采用固、液培养基相结合方法扩繁。取试管苗单节切段扦插,每瓶插20个茎段,20d长成5-10cm高小植株,继续切段繁殖,每月可繁5-8倍。 试管苗多节接种进行浅层静止液体培养。                 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养    MS+NAA 0.2-0.5mg/L+D-泛酸钙10mg/L+3%蔗糖,20-25 ℃ ,3000-4000LX,14-16h/d,每3周继代一次,单芽茎段约1cm,可插也可平放原则试管苗用2年-3年。 4.培养基 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养 5. 驯化移植  马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养    基础苗成活后便可切繁,但切繁量的多少和质量的高低,除与水与温湿度条件有关外,正确的切繁方法和适宜的切繁苗龄也非常重要。脱毒苗切繁主要是剪取顶部芽尖茎段(主茎芽尖和腋芽芽尖)直接扦插。  6.脱毒苗切繁 马铃薯脱毒与快繁 园艺植物组织培养        在马铃薯的病毒鉴定中,汁液鉴定是最常用的方法,X病毒、S病毒和纺锤块状病毒很容易通过汁液来接种。 三、马铃薯无病毒苗的鉴定 1.指示植物鉴定 
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