M5动物组织含鼠尾直接PCR试剂盒.docx

北京聚合美生物科技有限公司 Mei5 Biotechnology, Co., Ltd M5 动物组织（含鼠尾）直接 PCR 试剂盒使用说明书 产品名称 单位 货号 M5 动物组织（含鼠尾）直接 PCR 试剂盒 100T MF280-01 M5 动物组织（含鼠尾）直接 PCR 试剂盒 500T MF280-05 【储存条件 】 2x DirectAmp PCR Mix -20 ℃ 保存，避免反复冻融， 3 周内短时间使用可放 4℃保存。其余常温或者 4 ℃保存，有效期 12 个月。 【产品简介 】 本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解鼠尾，释放的 DNA 无需纯化便可以作为模板，用高度耐抑制物的 2x DirectAmp PCR Mix 扩 增，扩增产物可直接上样电泳。适用范围：鼠尾、动物组织（哺乳动物，海洋动物，昆虫等） 、细胞等。特点：简单，高通量筛选； 一般扩增大小 2.5kb 。 【产品组分 】 MF280-01 MF280-05 Buffer AD1 0.75 ml 3.75 ml Buffer AD2 7.5 ml 37.5 ml 2x DirectAmp PCR Mix 1 ml 5 ml ddH 2O(PCR grade) 10 ml 50ml 【使用方法 】 1. 配制即用裂解液： 按照 10μ lBuffer AD1 + 90 μlddH 2 O = 100 μ l比例混合配制成即用裂解液。每个样品需要 75μl即用裂解液，具体 量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。 即用裂解液可常温存放 1个月。 取 75μl裂解液于 0.2 mL PCR 薄壁管中（没有 PCR 仪器者也可以用 0.5ml 离心管） 。然后加入 1-2mm 的鼠尾或者 2mm 见方的组织 （切记不可多加，多加反而抑制下游 PCR ），样品浸没在裂解液内。 3. 98 ℃裂解 30min （建议 PCR 仪上操作），根据情况裂解时间可以在 10 分钟 -1 小时内调整。 4. 取出离心管迅速放冰上，加入 75μ lBuffer AD2 ，混匀，即可直接用做 PCR 模板或置于 4℃或 -20 ℃保存。 PCR 扩增： 建议 PCR 条件 (以 20 μl反应体系为例 ) Components Volume Final Concentration 裂解混合物模板 1- 2 μl as required 2x DirectAmp PCR Mix 10 μl 1 × Forward Primer (10 μ M) 0.4 μl 0.2 μ M each Reverse Primer (10 μ M) 0.4 μl 0.2 μ M each ddH 2 O to final volume 20 μl Not applicable 北京市海淀区学院路甲 5 号 768 创意园 B-1211 热线电话： （86 ） 010北京聚合美生物科技有限公司 Mei5 Biotechnology, Co., Ltd PCR 循环 95 ℃ 5min 94 ℃ 30 sec 54-60 ℃ 30 sec 35-40 cycles 72 ℃ 1 kb/min 72 ℃ 5-10 min 【注意事项 】 1. 如果扩增条带较弱，可以适当增加或者减少模板加入量，裂解混合物模板一般可以在 1μl-4μl内调节。 如果非特异扩增较多，可调整退火温度，或者适当增减模板用量。 各溶液使用完毕后，应该立刻盖紧盖子，以免PH 改变影响质量。 【备注】 本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。 北京市海淀区学院路甲 5 号 768 创意园 B-1211 热线电话： （86 ） 010