真核细胞rna提取的实验报告.docVIP

真核细胞 rna 提取的实验报告 篇一：真核细胞 RNA的提取 一．原理 本方法利用盐酸胍抑制 RNA酶，匀浆裂解细胞， 采用有机溶剂抽提 去除蛋白质。通过选择性沉淀 RNA分子去除 DNA。 二．方法 样品处理 ⑴组织样品处理：取新鲜的组织样品称重后，剪碎成约 1cm2的组织块直接加入匀浆液中进行 RNA提取，或液氮中速冻 -70 ℃保存。 ⑵贴壁培养细胞处理： 用 PBS洗细胞一次， 吸干溶液后将培养板快速移至液氮中冷冻后转到 -70 ℃保存；或加入 1ml 匀浆至培养板中直接裂解细胞，然后将粘稠的裂解液进一步匀浆。 ⑶悬浮培养细胞处理： 离心收集细胞，用 PHS悬浮漂洗再田心收集，若不立即提取 RNA，则可经液氮速冻后转至一 70℃贮存备用。 2 ．加 l 倍体积盐酸胍匀浆液 [ 至准备好的样品细胞中，高速匀浆 1min。 3 ．匀浆液 5000g，室温离心 10min。 4 ．将上清移至一个干净离心管中，加入 0.1 体积的 3mol／L 乙酸 钠，混匀，再加 5 体积预冷的乙醇，立即充分混匀， -20 ℃放置至少 小时。 ．5000g 0 ℃离心 10 分钟沉淀核酸，弃上清液，室温干燥。 ，每个提取 RNA的组织或细胞样品中，加入 l0 ～15min 盐酸胍匀 2016 全新精品资料 - 全新公文范文 -全程指导写作 –独家原创 1 / 10 浆液Ⅱ，