基于金壳磁珠的人淋巴细胞捕获与辐射受损评价技术研究.pdfVIP

目 录 摘 要i ABSTRACTii 第一章 绪论1 1.1 研究背景及意义1 1.1.1 研究背景1 1.1.2 课题研究意义3 1.2 国内外研究现状4 1.2.1γ-H2AX 检测研究现状4 1.2.2 免疫磁珠分选细胞的研究现状7 1.3 论文主要研究内容10 第二章 淋巴细胞捕获过程的理论分析及仿真12 2.1 磁珠与淋巴细胞复合物在流道内的受力分析12 2.1.1 磁珠所受磁场力的计算12 2.1.2 细胞所受流场力的计算14 2.1.3 复合物所受重力与浮力14 2.2 磁珠与淋巴细胞复合物捕获过程仿真15 2.2.1 几何建模15 2.2.2 网格划分17 2.2.3 求解器的设置17 2.2.4 物理场的设置及求解17 2.3 关键参数对细胞捕获的影响20 2.3.1 永磁铁位置对流道内磁通密度梯度的影响21 2.3.2 初始流速对细胞捕获的影响21 2.3.3 磁珠粒径对细胞捕获的影响23 2.3.4 永磁体剩磁强度对细胞捕获的影响24 2.4 本章小结25 第三章 微流控内淋巴细胞的捕获及捕获效果表征26 3.1 金壳磁珠的制备26 3.1.1金壳磁珠的表征26 3.2 金壳磁珠的表面羧基化及偶联抗体28 第 页I 3.3 人淋巴细胞与金壳磁珠的结合情况28 3.4 微流控芯片的设计与制备29 3.4.1 微流控芯片的设计30 3.4.2 微流控芯片制备工艺30 3.5 实验方案及结果32 3.5.1 定性观察实验32 3.5.2 定量计算捕获效率实验35 3.5.3 金壳磁珠在全血中捕获淋巴细胞的效果35 3.6 本章小结36 第四章 人外周血淋巴细胞γ-H2AX 蛋白的免疫荧光分析37 4.1 γ-H2AX 蛋白的荧光标记实验准备37 4.2 抗体预实验38 4.2.1 双抗法标记肿瘤细胞38 4.2.2 单抗法标记肿瘤细胞39 4.3 利用流式细胞仪分析荧光标记后人淋巴细胞免疫光强度41 4.3.1 流式细胞仪工作原理41 4.3.2 基于流式细胞术法检测被荧光标记的γ-H2AX 蛋白42 4.4 本章小结46 第五章 总结与展望47 5.1 主要工作47 5.2 研究展望48 致 谢49 参考文献50 作者在学期间取得的学术成果54 第 页 II 表 目 录 表2.1 物质磁性分类16 表2.2 COMSOL 仿真参数 18 表2.3 初始流速对复合物捕获的影响23 表2.4 磁珠粒径对复合物捕获的影响24 表2.5 永磁铁剩磁对复合物捕获的影响25 表4.1 实验中使用的主要设备37 表4.2 实验中使用的主要试剂37 第 III 页