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流式细胞仪操作步骤 (FACSCalibur) 一、开机程序： 1. 检查鞘液桶和废液桶。确认鞘液充满状态（鞘液为鞘液桶体积的 3/4 位 置，可以连续工作 3 个小时左右）、盖紧黑盖、管道畅通、废液桶有足够空间容纳本批标本排弃的废液。 如果要添加鞘液， 要先释放鞘液桶中气压。 依次打开流式细胞仪 FACSCalibur 稳压器、主机开关、电脑开关，打印机。 气压阀置于加压位置，待流式细胞仪处于 STANDBY状态，做 Prime ，以排除管路中气泡。 二、运行 FACSComp软件、检查仪器状况 制备三色标准微球样本。 一般情况向 1ml 鞘液（或过滤 PBS）中加入 滴质控小微球，也可以根据实际情况调节浓度。 机器预热 5 min ，打开 FACSComp软件，选择保持路径。选择所需校正内容，如果使用的微球是新一批产品要 输入微球的批号 。 在软件界面左侧 Assay Selection 选项中选择质控类型，即实验过程中是否需要清洗样品。 上样品， 微球溶液上样之前要充分混匀。 功能键设置在“ RUN”。 仪器自动检查，并做电压、补偿等设置。 FACSComp软件运行完毕，显示结果通过测试。 做 Set up 。 打印校正结果，退出 FACSComp程序。 备注：在质控过程中，如果提示收集细胞速度慢可以提高细胞收集速度，但是 在调节灵敏度（ Sens）时，一定要用“