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【实验技巧】 lncRNA 研究策略之： RNA Pull Down 实验技术 lncRNA 研究策略之： RNA Pull Down 实验技术 RNA pull-down  是检测  RNA结合蛋白与其靶  RNA之间相互作用的主要实验手段之一。  RNA pull-down  使用体外转录法标记生物素  RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成  RNA-蛋白 质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过 Western Blot 实验检测特定的 RNA结合蛋白是否与 RNA相互作用。 1) lncRNA 筛选： 通过 lncRNA 芯片或 RNA测序 等方法对多对疾病模型和对照样本组织进行 lncRNA 表达谱分析； 通过 生物信息 学的方法筛选出具有表达差异的 lncRNA ，构建共表达网络， 预测 lncRNA 的靶基因； 通过 PCR或 Northern Blot 技术对候选 lncRNA 验证，确定其表达差异。 2) lncRNA 确定： 通过 5 RACE 获取  lncRNA 5  全长，  3 RACE  获取  lncRNA3  全长，最终拿到完整的  lncRNA 序列。 表达分析： 细胞水平表达 ：在细胞水平进行检测表达差异。 组织分布 ：检测不同组织、不同阶段表达特性。