氨基酸的分离鉴定(纸层析法).docxVIP

氨基酸的分离（纸层析法） 一、实验原理 1、 层析法乂称色谱法，是一种物理的分离方法。利用混合物中各组分物理化学 性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等） ，使各组 分以不同程度分布在固定相和流动相两相中， 并使各组分以不同速度移动，从而 得到有效的分离。 操作方式：纸层析、薄层层析、柱层析等 分离机理：分配层析、吸附层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析等 2、 纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法，展层溶剂由有机溶剂和水 组成。滤纸纤维上的羟基具有亲水性，在滤纸上水就被吸附在纤维素的纤维之间 形成固定相。当有机溶剂（流动相）沿纸流动经过层析点时，层析法上溶质就在 水相和有机相之间不断进行分配。由丁溶质就在水相和有机相之间不断进行分 配。由丁溶质中各组分的分配系数不同，移动速率也不同，因而可以彼此分开。 /原点到落剂觥瘢葛 只要条件（如温度、展层溶剂的组成）不变， 驾值是常数，故可根据值作定 性依据。 氨基酸无色，利用前三酮反应，可将氨基酸层析点显色作定性、定量用。 二、 实验器材 标准氨基酸溶液、滤纸、层析缸、保鲜膜、剪刀、毛细管、电吹风。 三、 实验试剂 1、 酸相溶剂：V［正丁醇（A.R） ］ : V［88%ff 酸］:V［水］=15 : 3: 2 2、 显色贮备液：V （0.4mol/L前三酮-异丙W） : V （甲酸）：V （水）=20: