4b 文库4-80教堂 学习参考 文档.pdf

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4. 基因文库的构建 4.1 基因组文库的构建 4.2 cDNA文库的构建 基因组文库和cDNA文库 的比较 河北农业大学生命科学学院,李莉云 4学时, 1 本章基本要求 基本要求:掌握基因文库的概念和构建过程, 基因文库的应用。 重点:基因文库和cDNA文库的构建;基因文库 的应用。 难点:全长cDNA的合成;基因文库和cDNA文库 的异同。 2 基因克隆与基因文库  基因工程前提条件是从生物体基因组中分离克隆目的 基因,目的基因获得之后,或确定其表达调控机制和 生物学功能;或建立高效表达系统,构建具有经济价 值的基因工程菌;或将目的基因在体外进行必要的修 饰,然后输回细胞内改良生物体的遗传性状,包括人 体基因治疗。  一般来说,目的基因的克隆战略分为两大类: 一类是构建感兴趣的生物个体的基因文库,即将某生 物体的全基因组分段克隆,然后建立合适的筛选模型 从基因组文库中挑出含有目的基因的重组克隆; 另一类是利用PCR扩增技术甚至化学合成法体外直接 合成目的基因,然后将之克隆表达。 3 基因文库 DNA library, DNA bank • DNA libraries are sets of DNA clones, each of which has been derived from the insertion of a different fragment into a vector followed by propagation in the host. • A clone is a genetically distinct individual or set of identical individuals • Genomic libraries and cDNA libraries GenBank? 4 transformation 5 Genomic libraries prepared from random fragments of genomic DNA, which may be inefficient to find a gene because of the huge abundance of the non-coding DNA cDNA libraries DNA copies (cDNA) synthesized from the mRNA by reverse transcription are inserted into a vector to form a cDNA library. Much more efficient in identifying a gene, but do not contain DNA coding functional RNA or noncoding sequence. 重点 6 基因文库与基因库 基因库是指某一生物

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