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4. 基因文库的构建
4.1 基因组文库的构建
4.2 cDNA文库的构建
基因组文库和cDNA文库
的比较
河北农业大学生命科学学院,李莉云
4学时,
1
本章基本要求
基本要求:掌握基因文库的概念和构建过程,
基因文库的应用。
重点:基因文库和cDNA文库的构建;基因文库
的应用。
难点:全长cDNA的合成;基因文库和cDNA文库
的异同。
2
基因克隆与基因文库
基因工程前提条件是从生物体基因组中分离克隆目的
基因,目的基因获得之后,或确定其表达调控机制和
生物学功能;或建立高效表达系统,构建具有经济价
值的基因工程菌;或将目的基因在体外进行必要的修
饰,然后输回细胞内改良生物体的遗传性状,包括人
体基因治疗。
一般来说,目的基因的克隆战略分为两大类:
一类是构建感兴趣的生物个体的基因文库,即将某生
物体的全基因组分段克隆,然后建立合适的筛选模型
从基因组文库中挑出含有目的基因的重组克隆;
另一类是利用PCR扩增技术甚至化学合成法体外直接
合成目的基因,然后将之克隆表达。
3
基因文库
DNA library, DNA bank
• DNA libraries are sets of DNA clones, each of
which has been derived from the insertion of
a different fragment into a vector followed by
propagation in the host.
• A clone is a genetically distinct individual or
set of identical individuals
• Genomic libraries and cDNA libraries
GenBank?
4
transformation
5
Genomic libraries prepared from random
fragments of genomic DNA, which may be
inefficient to find a gene because of the huge
abundance of the non-coding DNA
cDNA libraries DNA copies (cDNA) synthesized
from the mRNA by reverse transcription are
inserted into a vector to form a cDNA library.
Much more efficient in identifying a gene, but do
not contain DNA coding functional RNA or
noncoding sequence.
重点
6
基因文库与基因库
基因库是指某一生物
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